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Investigação do transcriptoma e do proteoma salivar e plasmático em indivíduos acometidos por diabetes mellitus tipo 2, dislipidemia e doença periodontal crônica

Processo: 14/16148-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2015
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2018
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Periodontia
Convênio/Acordo: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Pesquisador responsável:Raquel Mantuaneli Scarel Caminaga
Beneficiário:Sâmia Cruz Tfaile Corbi
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Bolsa(s) vinculada(s):15/08678-1 - Investigação do proteoma salivar e plasmático em indivíduos acometidos por diabetes mellitus tipo 2, dislipidemia e doença periodontal crônica, BE.EP.PD
Assunto(s):Diabetes mellitus tipo 2   Doenças periodontais   Mediadores da inflamação   Polimorfismo genético   Proteínas e peptídeos salivares   Dislipidemias

Resumo

O objetivo deste projeto de pesquisa é realizar análises complementares do transcriptoma (estudo 1) e investigar o proteoma salivar e plasmático (estudo 2) de indivíduos acometidos por Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2, compensados/descompensados metabolicamente), Dislipidemia e Doença Periodontal Crônica (DP). O desenvolvimento do estudo 1 visa complementar o recém-concluído Doutorado da solicitante (Bolsa Doutorado FAPESP 2009/16233-9, e Auxílio Pesquisa FAPESP 2010/10882-2) em que foram investigados 5 grupos de pacientes (com 30 pacientes cada): Grupo 1- Indivíduos acometidos por DM2, descompensados metabolicamente (HbA1c e 8,0%), com dislipidemia e com DP; Grupo 2- Indivíduos com DM2, compensados metabolicamente (HbA1c < 8,0%), com dislipidemia e com DP; Grupo 3- Indivíduos sem DM2, com dislipidemia e com DP; Grupo 4- Indivíduos sem DM2, sem dislipidemia e com DP; Grupo 5- Indivíduos sem DM2, sem dislipidemia e sem DP. No Doutorado os dados dos microarrays foram analisados das seguintes formas: Grupo 1 + Grupo 2 vs Grupo 3; Grupo 1 vs Grupo 2; Grupo 1 vs Grupo 3, Grupo 2 vs Grupo 3; Grupo 3 vs Grupo 4; Grupo 4 vs Grupo 5. Para complementar dos resultados do transcriptoma, neste estudo 1 propomos realizar análises de Bioinformática e Bioestatística semelhantemente às comparações acima, só que considerando como controle sempre o grupo 5; da seguinte maneira: Grupo 1 + Grupo 2 vs Grupo 5; Grupo 1 vs Grupo 5; Grupo 2 vs Grupo 5; Grupo 3 vs Grupo 5. Serão selecionados nas mencionadas comparações de grupos, 2 a 3 genes diferencialmente expressos (hipo/ hiperexpressos) e que podem ter algum papel na fisiopatologia das alterações analisadas para serem validados por RT-qPCR (Transcriptase-Reversa seguida de Reação em Cadeia da Polimerase quantitativo em Tempo Real). No estudo 2 será investigado o proteoma salivar e plasmático de cada um dos citados grupos de indivíduos para identificação, caracterização e quantificação das proteínas mais/menos abundantes na saliva. Serão confeccionados géis SDS-PAGE em gradiente de poliacrilamida entre 4 e 20% e também géis PAGE nativos para separação e quantificação das proteínas. Em seguida, será utilizada Cromatografia Líquida por Fase Reversa e Cromatografia Líquida Tandem Espectrometria de Massas. Serão selecionadas uma proteína com maior abundância e outra com menor abundância em cada grupo Grupo 1, Grupo 2, Grupo 3 e Grupo 4 em comparação ao grupo controle Grupo 5 para validação por ELISA ou Western Blotting. É importante realizar este presente estudo, pois os genes e/ou proteínas diferencialmente expressos em cada condição, após validados, poderão ser investigados como novos alvos terapêuticos, além de serem úteis para o diagnóstico e acompanhamento clínico dos pacientes acometidos por essas patologias. Além disso, também se espera contribuir para a elucidação dos mecanismos moleculares envolvidos nessas doenças. (AU)

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