Análise ultraestrutural de oócitos e blastocistos bovinos produzidos in vitro a partir de oócitos maturados na presença de moduladores de AMPc

• Processo: 15/02557-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2015
• Data de Término da vigência: 10 de outubro de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Marcelo Fábio Gouveia Nogueira
• Beneficiário: Eduardo Montanari Razza
• Supervisor: Poul Hyttel
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Copenhagen, Copenhagen, Dinamarca
• Vinculado à bolsa: 12/23409-9 - Expressão gênica diferencial, análise ultraestrutural e avaliação do perfil lipídico de blastocistos bovinos produzidos in vitro a partir de oócitos maturados convencionalmente ou pelo sistema SPOM, BP.DR
• Assunto(s): Blastocisto Bovinos Maturação in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Blastocisto | bovino | maturação in vitro | oócito | Prematuração | Ultraestrutura | Produção in vitro de Embriões

Resumo

Na maturação in vitro (MIV) não são utilizados hormônios superestimulatórios in vivo evitando, desse modo, excessivos gastos e manipulações do animal, além dos efeitos prejudiciais iatrogênicos da superestimulação ovariana. Entretanto, a eficiência dos sistemas de MIV ainda não atingem as expectativas devido à incapacidade em simular os eventos fisiológicos que ocorrem in vivo (como principal exemplo, a sincronização entre as maturações nuclear e citoplasmática do oócito). Por esta razão, o incremento dos meios de MIV é um alvo cada vez mais visado nas pesquisas da área reprodutiva. A avaliação e caracterização celular, por meio da morfologia e da distribuição das organelas, fornece resultados consistentes na caracterização do embrião, quando este é analisado ultraestruturalmente. Esta técnica pode ser aplicada, a fim de identificar oócitos e blastocistos produzidos in vitro que possuem melhor qualidade (morfológica e fisiológica) e competência para sua posterior implantação e desenvolvimento. Portanto, o presente trabalho visa comparar o sistema de MIV convencional com um sistema que usa uma prematuração com drogas moduladoras de AMPc com o objetivo de proporcionar sincronia entre a maturação nuclear e citoplasmática (brevemente: forskolin e IBMX na prematuração por 2h seguido de 22 h de maturação com FSH). Após a prematuração, tanto oócitos quanto os blastocistos produzidos serão avaliados por análise ultraestrutura (microscopia eletrônica de transmissão, Universidade de Copenhague, Dinamarca). O Department of Veterinary Clinical and Animal Sciences, juntamente com o Professor Poul M. Hyttel, é referência mundial no campo da referida pesquisa e o ganho acadêmico oriundo da realização deste estágio, já previsto na proposta inicial do projeto regular, compreende tanto o processo original do aluno (2012/23409-9) quanto o projeto temático bilateral entre Brasil e Dinamarca "GIFT" (2012/50533-2). A comunhão entre os dados a serem obtidos com este projeto com aqueles obtidos por meio da pesquisa no Brasil (dados da performance in vitro de ambos os sistemas de maturação, análise do perfil lipídico por MALDI-MS de blastocistos, expressão gênica diferencial de 45 genes relacionados a qualidade embrionária) poderão fornecer um indicador geral e confiável de qualidade embrionária, que abrangesse a implantação, o desenvolvimento ou a criopreservação em rotinas comerciais de produção in vitro. (AU)