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Influência do fluoreto na expressão de proteínas de membrana em linhagem de células mesenquimais

Processo: 15/04565-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de junho de 2015
Vigência (Término): 30 de novembro de 2017
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Odontopediatria
Pesquisador responsável:Flavia Mauad Levy
Beneficiário:Juliana Sanches Trevizol
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
Assunto(s):Proteômica   Fluoretos   Expressão de proteínas   Proteínas da membrana   Membrana celular

Resumo

O recente desenvolvimento de técnicas proteômicas tem permitido a análise do perfil proteico completo dos sistemas biológicos, permitindo um melhor entendimento da fisiologia normal do organismo, bem como dos mecanismos de doenças, descoberta de biomarcadores para detecção precoce de doenças, identificação de novas terapias e descobertas de fármacos. Este estudo usará técnicas proteômicas para analisar os efeitos do fluoreto (F) na viabilidade celular e na expressão de proteínas de membrana de células mesenquimais, de duas linhagens de camundongos com diferentes susceptibilidades à fluorose dentária. Para tal, serão avaliados os efeitos de diferentes concentrações de NaF na viabilidade das células mesenquimais obtidas a partir de animais A/J (susceptíveis à fluorose) e 129P3/J (resistentes à fluorose) por ensaios MTT, e por quantificação de proteínas totais; e também avaliará os efeitos de diferentes concentrações de NaF na expressão de proteínas de membrana da membrana celular, em linhagens de células mesenquimais A/J e 129P3/J. Estas células mesenquimais (9ª passagem) serão plaqueadas em meio ±-MEM/10% SBF e serão tratadas com concentrações de NaF de zero, 10-5, 10-3 M, no tempo de exposição de 6h. As proteínas de membrana das células mesenquimais serão isoladas por ultracentrifugação. Após a extração das proteínas de membrana, será realizada a análise proteômica livre de marcadores, utilizando n-LS-ESI-MS/MS. (AU)