Busca avançada
Ano de início
Entree

Bioestimulação de célula-tronco mesenquimal de rato sob ação da luz contínua e pulsátil de 630 nm utilizando LED.

Processo: 15/01239-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Vigência (Início): 01 de maio de 2015
Vigência (Término): 31 de janeiro de 2016
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
Pesquisador responsável:Elenice Deffune
Beneficiário:Ana Lívia de Carvalho Bovolato
Instituição-sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:13/19998-1 - Bioestimulação de célula-tronco mesenquimal de rato sob ação da luz contínua e pulsátil de 630 nm utilizando LED, AP.R
Assunto(s):Cultura de células   Células-tronco mesenquimais   LED

Resumo

Foram desenvolvidas no primeiro ano de atividade, as tarefas previstas na sequência de planejamento do experimento, como a cultura de células-tronco mesenquimais in vitro, o uso do LED. O objetivo geral do projeto é a avaliação da ação do LED de 630nm de comprimento como bioestimulador de CTM em cultura em duas diferentes situações: exposição à luz contínua e à luz pulsátil. Os objetivos específicos são: 1) Estabelecer parâmetros quantitativos e qualitativos pelo uso do LED como bioestimulador;2) determinar a viabilidade celular e o tempo de confluência em cultura a 80%; 3) caracterizar fenotipicamente a expressão de marcadores de superfície; 4) estabelecer o índice de apoptose e necrose celular; 5) monitorar a secreção de citocinas no sobrenadante das células em cultura; 6) determinar o potencial de diferenciação osteo, condro e adipogênico; 7) analisar o índice de dano do DNA pelo teste do cometa e micronúcleo. Como já justificado na liberação da bolsa TT3 para o primeiro ano, há um grande número de procedimentos técnicos envolvendo a cultura celular, desde a obtenção e extração das células- tronco mesenquimais, sua quantificação, caracterização, expansão e diferenciação, a bolsa TT-III terá foco exatamente nos procedimentos de cultura celular, sendo válida a justificativa para o segundo ano, acrescido do fato de que as análises de diferenciação em trilinhagem, comprando com o grupo controle, a partir da expansão das CTMs do banco criado no primeiro ano, despendem tempo e avaliações diárias das culturas, bem como a posteriori, os processos de citoquímica. Estes procedimentos requerem treinamento especializado, cuidado na manipulação e o preparo de meios de culturas e aditivos que tornam a atividade exclusiva. O bolsista irá auxiliar o mestrando, em todas as etapas da cultura celular, independente do tipo de luz a ser aplicado, sendo que as atividades do mestrando extrapolam a cultura propriamente dita. Envolvem, pois, a realização de uma gama variada de técnicas como imunohistoquímica, análise de dano de DNA pela realização do teste cometa e micronúcleo e as determinações do índice de apoptose e necrose associados as quantificações de citocinas pela metodologia de citometria de fluxo.