Características morfológicas de leucócitos e plaquetas de pacientes com anemia falciforme e talassemia: análise por citometria de imagem (Amnis ImageStream)

• Processo: 15/07637-0
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Vigência (Início): 01 de agosto de 2015
• Vigência (Término): 31 de julho de 2019
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Nicola Amanda Conran Zorzetto
• Beneficiário: Flavia Garcia
• Instituição-sede: Centro de Hematologia e Hemoterapia (HEMOCENTRO). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/00984-3 - Doenças dos glóbulos vermelhos: fisiopatologia e novas abordagens terapêuticas, AP.TEM
• Assunto(s): Anemia falciforme Talassemia Hematologia

Resumo

As hemoglobinopatias são doenças que, apesar de resultar de alterações em genes que codificam cadeias de globinas diferentes, são caracterizadas por hemólise intra e extravascular e, consequentemente, por inflamação crônica (Stuart e Nagel, 2004). Os leucócitos têm um importante papel na resposta inflamatória, onde monócitos e neutrófilos, quando ativados, migram para os sítios de liberação de quimiocinas. Na anemia falciforme (AF), a ativação de leucócitos resulta na sua adesão à parede vascular, e é esta adesão que, aparentemente, inicia os processos vaso-oclusivos em vasos da microcirculação (Almeida et al., 2012). Além disso, nos últimos anos, nosso grupo tem relatado o importante papel das plaquetas na resposta inflamatória, particularmente na AF, com dados que evidenciam a contribuição desses fragmentos celulares na síntese de mediadores inflamatórios e na ativação endotelial (Proença et al., 2010; Proença et al., em submissão). Acreditamos que leucócitos e plaquetas circulem em um estado ativado nas doenças caracterizadas por hemólise, de forma que, no presente trabalho, temos como objetivo realizar uma análise comparada de características morfológicas e fenotípicas de leucócitos e plaquetas de pacientes com anemia falciforme, pacientes com talassemia intermediária e indivíduos controles. Estas análises serão feitas utilizando o equipamento Amnis ImageStream, o qual propomos adquirir no atual projeto temático. O citômetro de fluxo com imagem ImageStream combina a técnica de citometria de fluxo com microscopias ótica e de fluorescência. Assim, é possível visualizar a morfologia de cada célula e, simultaneamente, localizar e quantificar moléculas marcadas com anticorpos fluorescentes; o que torna esse equipamento ideal para investigar a ativação celular.