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Expressão estável e transiente do fator VII da coagulação em células humanas adaptadas para crescimento em suspensão e meios livres de soro fetal bovino

Processo: 15/10675-0
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
Vigência (Início): 13 de março de 2016
Vigência (Término): 16 de outubro de 2016
Área do conhecimento:Engenharias - Engenharia Química - Processos Industriais de Engenharia Química
Pesquisador responsável:Kamilla Swiech Antonietto
Beneficiário:Rafael Tagé Biaggio
Supervisor no Exterior: Amine A. Kamen
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Local de pesquisa : McGill University, Montreal, Canadá  
Vinculado à bolsa:14/01404-0 - Avaliação do potencial de crescimento e produção de proteínas recombinantes de células humanas adaptadas para crescimento em suspensão e meios de cultura livres de soro fetal bovino, BP.DR
Assunto(s):Proteínas recombinantes

Resumo

O fator VII da coagulação é uma glicoproteína dependente de vitamina K, importante no processo de coagulação, sendo uma das moléculas envolvidas na formação do coágulo. Atualmente, o produto comercial é produzido na célula murina BHK-21, o que pode trazer desvantagens considerando a complexidade das modificações pós traducionais desta proteína. Células murinas não possuem a maquinaria necessária para realizar glicosilações idênticas ao padrão humano. Estas diferenças no padrão de glicosilação podem gerar respostas imunes e a proteína pode ser rapidamente eliminada da corrente sanguínea. Além disso, bioprocessos de produção de proteínas recombinantes têm focado no uso de células cultivadas em suspensão e em meios livres de soro fetal bovino. Baseado nisto, o objetivo deste projeto é expressar o fator VII da coagulação na célula humana Hek293 adaptada para crescimento em suspensão e meio de cultura livre de soro fetal bovino de maneira estável e transiente. Esta tecnologia, será depois aplicada às células que estão sendo usadas no projeto de doutorado.