Expressão e mutação sítio dirigida de alpha-L-fucosidases de aracnídeos

• Processo: 15/11354-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
• Vigência (Início): 14 de março de 2016
• Vigência (Término): 13 de setembro de 2016
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Adriana Rios Lopes
• Beneficiário: Natalia Nappi Perrella
• Supervisor: Stephen George Withers
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Local de pesquisa: University of British Columbia, Vancouver (UBC), Canadá
• Vinculado à bolsa: 14/15732-0 - Metabolismo de fucose, alpha-L-fucosidases e fucosiltransferases: caracterização enzimática, mecanismo de catálise e papel fisiológico, BP.DD
• Assunto(s): Enzimologia Carboidratos alfa-L-fucosidase Glicoconjugados Mutagênese sítio-dirigida Aracnídeos Arachnida
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alpha-L-fucosidases | Arachnida | Enzimologia

Resumo

Os carboidratos são moléculas diversas e complexas envolvidas em muitas funções biológicas nos organismos vivos. A L-Fucose é um componente de muitas glicoconjugados sintetizados por microrganismos, plantas e mamíferos. Glicoconjugados presentes na superfície de células de mamífero estão relacionados com um certo número de processos fisiológicos e patológicos, incluindo: a adesão célula-célula, a diferenciação celular, resposta imune, a fertilização, a infecção viral e bacteriana e a progressão de tumores. As ±-L-fucosidases são glicosídeo hidrolases que catalisam a hidrólise de ligações glicosídicas entre um resíduo de fucose ligado a qualquer outra molécula. A ausência desta enzima está associada a deficiências e condições patológicas, incluindo: fucosidose, fibrose cística, câncer e inflamação. Algumas fucosidases digestivas tem sido caracterizadas em várias espécies de moluscos. Recentemente, descrevemos a presença de fucosidase no sistema digestivo do gastrópode Biomphalaria glabrata e de algumas espécies de artrópodes como o carrapato Amblyomma cajennense e a aranha Nephilengys cruentata. Alguns resultados indicam que a fucosidase pode ter um papel de defesa contra a infecção pelo agente patogênico. Análises do transcriptoma e proteoma dos artrópodes que estamos estudando permitiram o alinhamento das suas sequencias com as ±-L-fucosidases bacterianas e humanas. Estes alinhamentos mostraram que o nucleófilo é conservada ao longo de todas as fucosidases e sugerem que as fucosidases de artópodes mantém um resíduo envolvido na catálise ácido/base idêntico ao da fucosidase humana. No entanto, Shaikh e colegas (2013) têm apontado que as fucosidases bacterianas não tenho um resíduo envolvido na catálise ácido/base conservado. Alguns de nossos resultados indicam que os carrapatos e aranhas apresentam fucosidases com especificidades e padrão de expressão diferenciados possivelmente devido a dietas muito distintas. Este projeto permitirá um estudo detalhado do mecanismo catalítico e especificidade de fucosidases de aracnídeos através de mutação sítio-dirigida. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

PERRELLA, NATALIA N.; WITHERS, STEPHEN G.; LOPES, ADRIANA R.. Identity and role of the non-conserved acid/base catalytic residue in the GH29 fucosidase from the spider Nephilingis cruentata. GLYCOBIOLOGY, v. 28, n. 12, p. 925-932, DEC 2018. (14/15732-0, 15/23745-7, 15/11354-3)