Envolvimento da via da GRASP na externalização da dissulfeto isomerase proteica-A1 e sua implicação na resposta de células endoteliais a shear stress

• Processo: 15/06210-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Vigência (Início): 01 de setembro de 2015
• Vigência (Término): 30 de junho de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Celular
• Pesquisador responsável: Francisco Rafael Martins Laurindo
• Beneficiário: Thaís Larissa Araujo de Oliveira Silva
• Instituição Sede: Instituto do Coração Professor Euryclides de Jesus Zerbini (INCOR). Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 17/01130-6 - Mecanismos e implicações de inibidores seletivos da Grp94 de superfície em células de cancer de mama, BE.EP.PD
• Assunto(s): Biologia celular Integrinas Proteínas da matriz do complexo de Golgi Isomerases de dissulfetos de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: dissulfeto isomerase proteica epi | Grasp | integrinas | pericelular | shear stress laminar | Biologia Celular

Resumo

Dissulfeto isomerase proteica (PDI A1 ou PDI) é uma chaperona essencial para o enovelamento proteico redox no reticulo endoplasmático, com papel emergente em vias de sinalização e homeostase redox, incluindo particularmente interação com NADPH oxidases. Um pool específico da PDI ocorre no espaço extracelular de vários tipos celulares e regula processos como trombose, adesão celular, infecção viral e remodelamento vascular. Este pool, denominado PDI epi/pericelular (pecPDI), modula reações tiol-redox que regulam integrinas, trombospondina, metaloproteases, galectina 9, glicoproteína gp120 do vírus HIV e fator tecidual, dentre outros. A interação entre pecPDI e integrinas (um importante mecanosensor) e o papel redox da pecPDI sugerem uma possível modulação pela pecPDI da resposta a shear stress em células endoteliais. Nosso grupo investiga a rota de externalização da PDI e recentemente identificamos uma via independente de Golgi e envolvendo GRASP, uma proteína recém-descrita como via não convencional de secreção. Nossa hipótese é que em resposta a shear stress em células endoteliais, a pecPDI é externalizada pela via GRASP e, juntamente com outras ações potenciais de GRASP, age como um mecanismo integrador de mecanotransdução. Investigaremos o efeito da via GRASP-pecPDI na ativação de integrinas e organização do citoesqueleto, assim como mecanismos subcelulares associados, em resposta a shear stress laminar em células endoteliais. Neste sentido, avaliaremos, em resposta a shear stress laminar: a cinética de externalização da PDI, proteínas interatoras com PDI na superfície celular, efeito de pecPDI na ativação de integrinas, alteração do estado redox de integrina e PDI, efeito do ganho e perda de função de GRASP55/65 e fosforilação da GRASP. Estes dados devem contribuir para um entendimento integrado de vias de mecanotransdução endotelial, possibilitando avanços conceituais e implicações fisiopatológicas.

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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TANAKA, LEONARDO Y.; ARAUJO, THAIS L. S.; RODRIGUEZ, I, ANDRES; FERRAZ, MARIANA S.; PELEGATI, VITOR B.; MORAIS, MAURO C. C.; DOS SANTOS, ALINE M.; CESAR, CARLOS L.; RAMOS, ALEXANDRE F.; ALENCAR, ADRIANO M.; et al. Peri/epicellular protein disulfide isomerase-A1 acts as an upstream organizer of cytoskeletal mechanoadaptation in vascular smooth muscle cells. AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-HEART AND CIRCULATORY PHYSIOLOGY, v. 316, n. 3, p. H566-H579, MAR 2019. (13/17115-5, 13/06241-0, 15/06210-2, 13/07937-8)

ARAUJO, THAIS L. S.; VENTURINI, GABRIELA; MORETTI, ANA I. S.; TANAKA, LEONARDO Y.; PEREIRA, ALEXANDRE COSTA; LAURINDO, FRANCISCO R. M.. Cell-surface HSP70 associates with thrombomodulin in endothelial cells. CELL STRESS & CHAPERONES, v. 24, n. 1, p. 273-282, JAN 2019. (15/06210-2, 13/07937-8)

SALIBE-FILHO, WILLIAM; ARAUJO, THAIS L. S.; MELO, EVERTON G.; COIMBRA, LUIZA B. C. T.; LAPA, MONICA S.; ACENCIO, MILENA M. P.; FREITAS-FILHO, ORIVAL; CAPELOZZI, VERA LUIZA; TEIXEIRA, LISETE RIBEIRO; FERNANDES, CAIO J. C. S.; et al. Shear stress-exposed pulmonary artery endothelial cells fail to upregulate HSP70 in chronic thromboembolic pulmonary hypertension. PLoS One, v. 15, n. 12, DEC 3 2020. (20/11249-3, 19/20435-8, 15/06210-2, 18/13739-8, 13/07937-8)