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Avaliação estrutural e imunolocalização de SHBG, ar e importinas em epidídimos de ratos tratados com antagonista de receptores H2 - cimetidina

Processo: 15/09341-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de outubro de 2015
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2017
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
Pesquisador responsável:Estela Sasso Cerri
Beneficiário:Fabiane de Santi
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Assunto(s):Imunofluorescência   Western blotting   Morfometria   Cimetidina

Resumo

A cimetidina é um antagonista de receptores histamínicos H2 utilizado para o tratamento de úlceras duodenais e gástricas. Em pacientes fazendo uso deste fármaco foram observados efeitos colaterais, tais como: diminuição da libido, impotência, desenvolvimento de ginecomastia e redução da contagem espermatozoides. Em testículos de ratos, a cimetidina tem causado alterações significantes tanto no epitélio seminífero, quanto nos componentes do tecido intersticial. Considerando a ação anti-histaminérgica e antiandrogênica da cimetidina, bem como a escassa literatura referente ao efeito deste fármaco nos ductos do sistema genital masculino, foi proposto avaliar o efeito deste fármaco na biologia estrutural e funcional do epidídimo de ratos. Serão utilizados 20 ratos, distribuídos em dois grupos: grupo controle (GC; n=10) e grupo experimental (GE; n=10). Os animais serão tratados durante 50 dias consecutivos, sendo que os do GE receberão injeções intraperitoneais de cimetidina (100mg/kg) e os animais do GC receberão solução fisiológica. De quatro animais de cada grupo, as caudas dos epidídimos serão coletadas e armazenas em freezer -80°C para realização do Western Blot. Dos animais restantes (seis animais por grupo), as caudas dos epidídimos serão fixadas e processadas para inclusão em historesina e parafina. Fragmentos das caudas epididimárias também serão processados para inclusão em Araldite e análise ao microscópio eletrônico de transmissão. Os cortes serão corados pelo método da H.E. e do Tricrômico de Masson para análises morfológicas e morfométricas. Serão realizadas as seguintes análises morfométricas: medidas dos diâmetros das secções do ducto epididimário, área coupada pelo tecido conjuntivo e número de células epiteliais. O método do Picrosirius será realizado para análise do tecido conjuntivo (colágeno) sob luz polarizada. Os cortes em parafina serão submetidos ao método do TUNEL e Imunofluorescência para a detecção de receptores de andrógenos (AR), globulina ligante de hormônio esteróide (SHBG) e importina ±. As áreas de tecido ocupadas por AR e SHBG serão quantitativamente analisadas. Todos os parâmetros quantitativos e morfométricos serão submetidos à análise estatística para a avaliação das diferenças entre os grupos. As diferenças entre os grupos serão também confirmadas por Western Blot.

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DE SANTI, FABIANE; BELTRAME, FLAVIA L.; HINTON, BARRY T.; CERRI, PAULO S.; SASSO-CERRI, ESTELA. Reduced levels of stromal sex hormone-binding globulin and androgen receptor dysfunction in the sperm storage region of the rat epididymis. Reproduction, v. 155, n. 6, p. 467-479, JUN 2018. Citações Web of Science: 2.

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