Desenvolvimento de vetores de entrega gênica baseados na cadeia leve de dineína Rp3 e no peptídeo T22 para direcionamento celular baseado em CXCR4

• Processo: 15/20193-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Vigência (Início): 05 de janeiro de 2016
• Vigência (Término): 21 de dezembro de 2016
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Adriano Rodrigues Azzoni
• Beneficiário: Marianna Teixeira de Pinho Favaro
• Supervisor: Neus Ferrer-Miralles
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Local de pesquisa: Universitat Autònoma de Barcelona (UAB), Espanha
• Vinculado à bolsa: 12/18850-8 - Desenvolvimento e avaliação in vitro e in vivo de vetores de entrega gênica baseados na cadeia leve de dineína Rp3 e peptídeos sintéticos, BP.DR
• Assunto(s): Receptores CXCR4 Vetores de doenças Dineínas Células tumorais Técnicas de transferência de genes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cell targeting | Cxcr4 | dynein | Gene Delivery | non viral vectors | Rp3 | gene delivery

Resumo

A definição de um vetor ideal de entrega gênica foi recentemente modificada para incluir a especificidade como uma característica central. Nosso grupo desenvolveu um vetor não viral baseado em uma dineína recombinante, nomeado T-Rp3, que se mostrou muito eficiente para entrada celular e tráfego intracelular. No entanto, sua aplicação in vivo pode ser severamente limitada pela falta de especificidade celular. Neste contexto, nossa recente colaboração com o grupo Nanobiotechnology localizado na UAB, Espanha, nos permite dar um passo além no nosso propósito de desenvolver vetores proteicos capazes de mimetizar vetores virais. Nossa experiência com a T-Rp3 pode agora ser complementada pela expertise deste grupo no desenvolvimento de sistemas direcionados de entrega, permitindo o desenvolvimento de uma proteína quimérica composta pela cadeia leve de dineína Rp3 e o T22, um peptídeo que se liga ao receptor de quimiocina C-X-C tipo 4 (CXCR4) e promove a internalização de forma específica. O receptor CXCR4 tem um papel importante em células tumorais uma vez que está super-expresso em mais de 23 tipos de cancer. A proteína proposta, T22-Rp3, deve transfectar eficientemente células que expressam CXCR4. Neste projeto, propomos a clonagem dos genes, produção e caracterização da proteína recombinante T22-Rp3, visando acrescentar a habilidade de direcionar a transfecção ao sistema T-Rp3. Células de adenocarcinoma colorretal (SW1417), entre outras, serão transfectadas in vitro para avaliar o potencial da proteína de promover a entrega de plasmídeos (pDNA) bem como siRNA. Desta forma, esperamos consolidar esta nova colaboração e avançar no estudo das aplicações de vetores baseados em dineína, buscando assim desenvolver um vetor não viral eficiente para entrega gênica. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DE PINHO FAVARO, MARIANNA TEIXEIRA; SANCHEZ-GARCIA, LAURA; SANCHEZ-CHARDI, ALEJANDRO; ROLDAN, MONICA; UNZUETA, UGUTZ; SERNA, NAROA; CANO-GARRIDO, OLIVIA; AZZONI, ADRIANO RODRIGUES; FERRER-MIRALLES, NEUS; VILLAVERDE, ANTONIO; et al. Protein nanoparticles are nontoxic, tuneable cell stressors. Nanomedicine, v. 13, n. 3, p. 255-268, FEB 2018. (15/20193-3)