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Exploração genética sobre os mecanismos de regulação do Sistema de Secreção do Tipo IV em Xanthomonas citri e como esse sistema medeia a morte contato-dependente

Processo: 15/18237-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2016
Vigência (Término): 31 de maio de 2019
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
Pesquisador responsável:Shaker Chuck Farah
Beneficiário:William Cenens
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:17/17303-7 - Estrutura e função de sistemas de secreção bacterianas, AP.TEM
Assunto(s):Bioquímica

Resumo

Durante a morte de bactérias vizinhas induzida pelo Sistema de Secreção do Tipo IV (T4SS) por Xanthomonas citri (Xac), diversas proteínas efetoras são secretadas e injetadas nas células alvo por um mecanismo contato-dependente. O primeiro objetivo deste projeto será investigar a função dessas proteínas efetoras. A avaliação da atividade de deleção de diferentes mutantes efetores em bactérias de diferentes espécies permitirá a discriminação entre efeitos antibacterianos e reguladores de proteínas efetoras distintas. Além disso, a expressão ectópica e condicional de proteínas efetoras combinada com estudos em interação proteica irão indicar seus alvos celulares. O segundo objetivo deste projeto envolve estratégias de inserção de transposon no genoma completo (whole-genome transposon insertion strategies) para identificar todos os loci envolvidos durante a competição de Xac com outras espécies de bactérias. A utilização de "straightforward classical transposon screen" irá revelar mutantes em vias regulatórios, toxinas (além de componentes estruturais do T4SS) e esta busca será expandida por uma técnica de Tn-seq, aumentando drasticamente o conhecimento genético na competição interbacteriana de Xac. Ademais, este objetivo pode revelar mecanismos alternativos que podem funcionar independentemente ou conjuntamente com o T4SS durante a competição interbacteriana. Por fim, o ultimo objetivo deste projeto será a análise da regulação, organização e localização de T4SS durante a competição interbacteriana por meio da combinação de microscopia de fluorescência com resolução temporal com diferentes técnicas de marcação de fluorescência.

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
CENENS, WILLIAM; ANDRADE, MAXUEL O.; LLONTOP, EDGAR; ALVAREZ-MARTINEZ, CRISTINA E.; SGRO, GERMAN G.; FARAH, CHUCK S. Bactericidal type IV secretion system homeostasis in Xanthomonas citri. PLOS PATHOGENS, v. 16, n. 5 MAY 2020. Citações Web of Science: 0.
BAYER-SANTOS, ETHEL; CENENS, WILLIAM; MATSUYAMA, BRUNO YASUI; OKA, GABRIEL UMAJI; DI SESSA, GIANCARLO; MININEL, IZABEL DEL VALLE; ALVES, TIAGO LUBIANA; FARAH, CHUCK SHAKER. The opportunistic pathogen Stenotrophomonas maltophilia utilizes a type IV secretion system for interbacterial killing. PLOS PATHOGENS, v. 15, n. 9 SEP 2019. Citações Web of Science: 1.

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