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Efeito do laser em baixa intensidade sobre a expressão gênica e proteica de diferentes fenótipos de macrófagos

Processo: 15/21219-6
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de dezembro de 2015
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2016
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina
Pesquisador responsável:Kristianne Porta Santos Fernandes
Beneficiário:Kaline de Brito Sousa
Instituição-sede: Universidade Nove de Julho (UNINOVE). Campus Vergueiro. São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Quimiocinas   Laser de baixa intensidade   Citocinas   Terapia a laser de baixa intensidade   Fatores de crescimento

Resumo

As interações entre o tecido e os macrófagos que o invadem após a ocorrência de uma lesão são determinantes para a evolução do seu reparo. Por outro lado, o laser em baixa intensidade (LBI) tem sido muito utilizado no tratamento de diferentes lesões teciduais no âmbito clínico e no experimental, mas pouco se conhece a respeito dos seus efeitos sobre os macrófagos. Os objetivos deste projeto são avaliar o efeito do LBI (2 parametros) sobre a expressão gênica e a síntese proteica de 12 produtos (importantes no processo de reparo tecidual) de macrófagos ativados/polarizados (para os fenótipos M1, M2a e M2c). As culturas de macrófagos serão ativadas/polarizadas por 24h, lavadas e irradiadas com laser vermelho (660 nm) e infravermelho (780 nm) nos mesmos parâmetros dosimétricos (70 mW, 17,5 J/cm2, 0,8J). Passados os períodos de incubação de 4 e 24 h, será realizada a análise da expressão de quimiocinas (cxcl2 (MIP-2a), ccl 2 (Mcp-1), ccl 3 (Mip-1a), ccl4 (Mip-1b)); citocinas (IL-1², IFN³, IL-6, TNF±, IL-13); e de fatores de crescimento (TGF²1, IGF1 e Vegfa) por meio de PCR array. O sobrenadante das culturas dos diferentes grupos experimentais (após 24 horas das irradiações) será utilizado para avaliar a produção proteica. Em cada situação experimental, células não irradiadas e não ativadas servirão como controle. Serão realizados três experimentos independentes, em cada metodologia citada. Todos os resultados serão submetidos à análise estatística.