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Papel das metaloproteinases e das células satélites no músculo sóleo durante o envelhecimento

Processo: 15/20453-5
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2016
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2016
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
Pesquisador responsável:Maeli Dal Pai
Beneficiário:Jéssica Silvino Valente
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Envelhecimento   Músculo estriado   Sistema musculoesquelético   Força muscular   Processos fisiológicos   Matriz extracelular   Zimografia   Análise morfológica   Western blotting   Ratos Wistar

Resumo

No envelhecimento há um declínio progressivo da força muscular, sendo este um processo fisiológico que gera fraqueza muscular, aumentando o risco de queda, especialmente em idosos, podendo levar à morte. A regeneração muscular também é alterada no envelhecimento, o que leva a uma deficiência neste processo e um comprometimento da manutenção da massa muscular, devido à diminuição do número ou da atividade de células satélites (CS). As CS são células miogênicas indiferenciadas que podem ser ativadas em resposta a miotraumas severos ou adaptativos, sendo esse processo importante para a regeneração, manutenção e turnover da massa muscular. Essas células expressam marcadores miogênicos, como o Pax7 no estado quiescente, e fatores de regulação miogênica, como o MyoD e Miogenina. Durante a regeneração muscular, as CS migram em direção a matriz extracelular que exerce um papel importante na ativação e proliferação dessas células. As MMPs (Metalloproteinases) da matriz extracelular, endoproteases capazes de clivar componentes da matriz extracelular, como colágeno, elastina e fibrilina, exercem um papel fundamental neste processo. O objetivo deste trabalho é avaliar o papel das MMPs e das células satélites no músculo sóleo durante o envelhecimento. Serão utilizados 24 ratos Wistar machos envelhecidos por 3, 12 e 22 meses. Ao final do experimento os animais serão pesados e sacrificados para a coleta de amostras do músculo sóleo (SL), para as análises morfológica, molecular e proteica. Para análise morfológica será realizada a coloração de Hematoxilina-Eosina e posteriormente mensurada a Área de Secção Transversal (AST) das fibras musculares. A análise da expressão dos genes MyoD, Miogenina, Pax 7, das MMP-2 e MMP-14 e do Colágeno I-±I será realizada através do RT-qPCR, a análise da expressão proteica será realizada através da técnica de Western Blot, e a análise proteolítica das MMP-2 e MMP-9 será realizada através da técnica de Zimografia. Os dados serão submetidos para análise estatística apropriada.