Produção de proteína recombinante e anticorpos: ferramentas essenciais para o estudo da participação da interação entre a proteína prion e STI1 (Stress inducible protein 1) na biologia de células-tronco embrionárias

• Processo: 15/25371-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Vigência (Início): 01 de janeiro de 2016
• Vigência (Término): 30 de junho de 2016
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Marilene Hohmuth Lopes
• Beneficiário: Beatriz de Luca Silva
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 11/13906-2 - Contribuição da co-chaperonina STI1 no desenvolvimento murino: células tronco embrionárias como modelo de estudo, AP.JP
• Assunto(s): Biologia celular Proteínas recombinantes Proteínas de choque térmico Príons Células-tronco Técnicas de genotipagem Anticorpos policlonais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anticorpos policlonais | Células-tronco | Genotipagem | Prion | proteína recombinante | Sti1 | Biologia Celular

Resumo

A co-chaperonina stress inducible protein-1 (STI1) interage especificamente com a proteína prion (PrP), relacionada a doenças neurodegenerativas, e juntas orquestram diferentes processos biológicos envolvidos na plasticidade neural durante a embriogênese e na fase adulta de murinos, tais como:autorrenovação de células-tronco neurais, neuritogênese, neuroproteção e consolidação da memória. Para aprofundarmos nossos conhecimentos sobre a função desse complexo em estágios iniciais do desenvolvimento murino a utilização da STI1 recombinante e anticorpos contra a proteína prion como ferramentas biológicas é de extrema valia em s ensaios in vitro de diferentes estudos do laboratório. Desta forma o principal objetivo dessa proposta é dar continuidade aos protocolos jápadronizados de expressão e purificação da STI1 recombinante em sistema heterólogo e imunização de camundongos PrP-nocautes para purificação de imunoglobulinas contra PrP. Além disso, o apoio técnico será de suma importância na expansão e manutenção de nossas linhagens de camundongos no biotério.Assim, a presença de um técnico diariamente no âmbito laboratorial para auxiliar na lavagem/esterilização de materiais, organização geral, preparação de soluções e meios de cultura éimprescindível para o desenvolvimento das atividades científicas referentes a esse projeto.