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Produção de proteína recombinante e anticorpos: ferramentas essenciais para o estudo da participação da interação entre a proteína prion e STI1 (stress inducible protein 1) na biologia de células-tronco embrionárias

Processo: 15/25371-7
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2016
Vigência (Término): 30 de junho de 2016
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
Pesquisador responsável:Marilene Hohmuth Lopes
Beneficiário:Beatriz de Luca Silva
Instituição-sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:11/13906-2 - Contribuição da co-chaperonina STI1 no desenvolvimento murino: células tronco embrionárias como modelo de estudo, AP.JP
Assunto(s):Biologia celular   Proteínas recombinantes   Proteínas de choque térmico   Células-tronco   Técnicas de genotipagem   Anticorpos policlonais

Resumo

A co-chaperonina stress inducible protein-1 (STI1) interage especificamente com a proteína prion (PrP), relacionada a doenças neurodegenerativas, e juntas orquestram diferentes processos biológicos envolvidos na plasticidade neural durante a embriogênese e na fase adulta de murinos, tais como:autorrenovação de células-tronco neurais, neuritogênese, neuroproteção e consolidação da memória. Para aprofundarmos nossos conhecimentos sobre a função desse complexo em estágios iniciais do desenvolvimento murino a utilização da STI1 recombinante e anticorpos contra a proteína prion como ferramentas biológicas é de extrema valia em s ensaios in vitro de diferentes estudos do laboratório. Desta forma o principal objetivo dessa proposta é dar continuidade aos protocolos jápadronizados de expressão e purificação da STI1 recombinante em sistema heterólogo e imunização de camundongos PrP-nocautes para purificação de imunoglobulinas contra PrP. Além disso, o apoio técnico será de suma importância na expansão e manutenção de nossas linhagens de camundongos no biotério.Assim, a presença de um técnico diariamente no âmbito laboratorial para auxiliar na lavagem/esterilização de materiais, organização geral, preparação de soluções e meios de cultura éimprescindível para o desenvolvimento das atividades científicas referentes a esse projeto.