Resumo
O interesse pela elucidação das características químicas e funcionais de toxinas obtidas a partir de peçonhas animais não é devido somente à sua relevância no envenenamento, mas também ao seu potencial terapêutico e aplicação biotecnológica. Com o advento das técnicas "ômicas", como o transcriptômica e proteômica, foi possível não só a caracterização dessas toxinas, mas também a identificação de novos componentes de interesse biotecnológico. Entretanto, apesar da diversidade de ações fisiológicas e do potencial farmacológico apresentado pelas toxinas animais, há uma discrepância entre o número de toxinas caracterizadas e a disponibilidade de proteínas que vêm a se tornar efetivamente um medicamento. Isso se deve principalmente às limitações na obtenção de toxinas em quantidades suficientes para uma caracterização estrutural e funcional detalhada das mesmas. Desta forma, a expressão heteróloga de proteínas consiste em uma alternativa para a obtenção de moléculas para o estudo das suas características funcionais e estruturais. Diante da grande aplicabilidade das técnicas ômicas e da expressão heteróloga, o presente trabalho tem como objetivo a realização do transcriptoma da serpente Bothrops moojeni e a expressão heteróloga em sistema de Pichia pastoris de toxinas com alto potencial biotecnológico e terapêutico, dentre elas as serinoproteases. Para tanto, serão empregadas técnicas de sequenciamento de nova geração para obtenção do transcriptoma da glândula da peçonha da serpente B. moojeni. Os dados gerados serão, então, avaliados para o levantamento geral da composição de transcritos da glândula da peçonha. Após a avaliação aprofundada dos componentes da peçonha e da glândula, as toxinas que apresentarem maior impacto científico, como proteases, dentre elas serinoproteases, serão selecionadas para expressão em sistema heterólogo de P. pastoris utilizando a tecnologia do DNA recombinante. Assim, esse projeto visa não apenas a compreensão da glândula de peçonha e de seus componentes por completo, mas também a aplicação dos produtos obtidos pelas técnicas ômicas por meio da sua expressão em sistema de heterólogo. (AU)
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