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Investigação de efeitos de superfície e presença de coroa proteica no processo de internalização celular de sistemas poliméricos nanoestruturados

Processo: 15/24686-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de março de 2016
Vigência (Término): 30 de setembro de 2019
Área do conhecimento:Ciências Exatas e da Terra - Química - Físico-química
Pesquisador responsável:Fernando Carlos Giacomelli
Beneficiário:Carlos Eduardo de Castro
Instituição-sede: Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil
Assunto(s):Coroa de proteína   Nanopartículas poliméricas   Espalhamento de radiação

Resumo

O projeto proposto tem como objetivo central a verificação do papel de parâmetros estruturas e efeitos de superfície na internalização celular de sistemas poliméricos nanoestruturados. A primeira etapa prevê a fabricação de nanopartículas poliméricas produzidas a partir de copolímeros em bloco biocompatíveis e sensíveis ao pH (PEOm-b-PDPAn, PMPCm-b-PDPAn e PHPMAm-b-PDPAn). Estas nanopartículas serão marcadas com a sonda fluorescente cumarina-6. A dinâmica, estrutura e morfologia das entidades nanométricas serão detalhadamente investigadas por técnicas de espalhamento de luz (dinâmico - DLS, estático - SLS e eletroforético - ELS) além de microscopia de força atômica (AFM). Na sequencia, a influência das características estruturais e superficiais das NPs no processo de internalização celular será experimentalmente investigada utilizando-se as técnicas de microscopia de fluorescência confocal (LSCM) e citometria de fluxo (FACS). Na Segunda etapa do cronograma proposto para o projeto de doutorado, as nanopartículas poliméricas biodegradáveis serão incubadas em ambiente plasmático e posteriormente se identificará e quantificará as proteínas formadoras da coroa proteica em cada caso. Está etapa será essencialmente conduzida utilizando-se as técnicas de centrifugação, eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massa (LC-MS). Posteriormente, serão conduzidos os mesmos ensaios de internalização celular para os complexos proteína-nanopartícula. O objetivo é identificar o efeito da nanobiointerface formada no processo supracitado. Os mesmas investigações serão finalmente conduzidas para NPs de PHPMAm-b-PDPAn funcionalizadas com a sequencia peptídica RGD(RGD-PHPMAm-b-PDPAn).

Publicações científicas (7)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DE CASTRO, CARLOS E.; RIBEIRO, CAROLINE A. S.; DA SILVA, MARIA C. C.; DAL-BO, ALEXANDRE GONCALVES; GIACOMELLI, FERNANDO C. Sweetness Reduces Cytotoxicity and Enables Faster Cellular Uptake of Sub-30 nm Amphiphilic Nanoparticles. Langmuir, v. 35, n. 24, p. 8060-8067, JUN 18 2019. Citações Web of Science: 0.
DE CASTRO, CARLOS E.; RIBEIRO, CAROLINE A. S.; ALAVARSE, ALEX C.; ALBUQUERQUE, LINDOMAR J. C.; DA SILVA, MARIA C. C.; JAEGER, ELIEZER; SURMAN, FRANTISEK; SCHMIDT, VANESSA; GIACOMELLI, CRISTIANO; GIACOMELLI, FERNANDO C. Nanoparticle-Cell Interactions: Surface Chemistry Effects on the Cellular Uptake of Biocompatible Block Copolymer Assemblies. Langmuir, v. 34, n. 5, p. 2180-2188, FEB 6 2018. Citações Web of Science: 9.
BATISTA, CARIN C. S.; ALBUQUERQUE, LINDOMAR J. C.; RIBEIRO, CAROLINE A. S.; DE CASTRO, CARLOS E.; MIRANDA, ERICA G. A.; NANTES, ISELI L.; ALBUQUERQUE, BRUNNO L.; CARDOSO, MATEUS B.; GIACOMELLI, FERNANDO C. Nano-Sized Silver Colloids Produced and Stabilized by Amino-Functionalized Polymers: Polymer Structure-Nanoparticle Features and Polymer Structure-Growth Kinetics Relationships. Journal of the Brazilian Chemical Society, v. 28, n. 9, p. 1608-1618, SEP 2017. Citações Web of Science: 5.
RIBEIRO, CAROLINE A. S.; DE CASTRO, CARLOS E.; ALBUQUERQUE, LINDOMAR J. C.; BATISTA, CARIN C. S.; GIACOMELLI, FERNANDO C. Biodegradable nanoparticles as nanomedicines: are drug-loading content and release mechanism dictated by particle density?. COLLOID AND POLYMER SCIENCE, v. 295, n. 8, p. 1271-1280, AUG 2017. Citações Web of Science: 4.
ALBUQUERQUE, LINDOMAR J. C.; DE CASTRO, CARLOS E.; RISKE, KARIN A.; CARLAN DA SILVA, MARIA C.; MURARO, PAULO I. R.; SCHMIDT, VANESSA; GIACOMELLI, CRISTIANO; GIACOMELLI, FERNANDO C. Gene Transfection Mediated by Catiomers Requires Free Highly Charged Polymer Chains To Overcome Intracellular Barriers. Biomacromolecules, v. 18, n. 6, p. 1918-1927, JUN 2017. Citações Web of Science: 10.
CARIN C. S. BATISTA; LINDOMAR J. C. ALBUQUERQUE; CAROLINE A. S. RIBEIRO; CARLOS E. DE CASTRO; ERICA G. A. MIRANDA; ISELI L. NANTES; BRUNNO L. ALBUQUERQUE; MATEUS B. CARDOSO; FERNANDO C. GIACOMELLI. Nano-Sized Silver Colloids Produced and Stabilized by Amino-Functionalized Polymers: Polymer Structure-Nanoparticle Features and Polymer Structure-Growth Kinetics Relationships. Journal of the Brazilian Chemical Society, v. 28, n. 9, p. -, Set. 2017.
DE CASTRO, CARLOS E.; BONVENT, JEAN-JACQUES; DA SILVA, MARIA C. C.; CASTRO, FABIANE L. F.; GIACOMELLI, FERNANDO C. Influence of Structural Features on the Cellular Uptake Behavior of Non-Targeted Polyester-Based Nanocarriers. Macromolecular Bioscience, v. 16, n. 11, p. 1643-1652, NOV 2016. Citações Web of Science: 3.

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