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Avaliação da atividade sintética de osteoblastos e pré-osteoblastos ácido cítrico e tetraciclina pela reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) quanto à expressão de metaloproteinases (MMP-2, MMP-9), osteopontina (OPN), sialoproteína óssea (BS

Processo: 16/08031-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Vigência (Início): 01 de junho de 2016
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2017
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Cirurgia Buco-maxilo-facial
Pesquisador responsável:Maria Lúcia Rubo de Rezende
Beneficiário:Luciana Tanaka de Castro
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:14/15136-8 - Efeito da desmineralização óssea nos processos de reparo tecidual: estudo microscópico, estrutural e da atividade de células osteoblásticas em calvária de ratos, AP.R
Assunto(s):Osteoblastos

Resumo

amostras ósseas removidas da calvária de ratos adultos machos albinos serão desmineralizadas com ácido cítrico ou tetraciclina e sobre elas serão cultivados osteoblastos MC3T3 e pré-osteoblastos oriundos de alvéolos de extração. Após 24, 48 e 72 horas, será avaliada a atividade sintética celular pela reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR)126 amostras ósseas de 10 mm de diâmetro obtidas de 126 ratos Wistar receberão cultura de Pré-osteoblastos e osteoblastos divididos em grupos de igual número para receberem os seguintes tratamentos: 1-AC 15 - amostras desmineralizadas por AC durante 15s; 2-AC 30 - amostras desmineralizadas por AC durante 30s; 3-AC 60 - amostras desmineralizadas por AC durante 60; 4-TCN 15 - amostras desmineralizadas por TCN durante 15s; 5-TCN 30 - amostras desmineralizadas por TCN durante 30; 6-TCN 60 - amostras desmineralizadas por TCN durante 60s; 7-C - amostras não desmineralizadas. Ao final de 24, 48 e 72 horas de cultura (seis amostras por período de cada grupo), a atividade sintética das células será avaliada através da RT-PCR, pela qual serão investigados os transcritos para MMP -2 e MMP-9; OPN; BSP; ANKH, fosfatase alcalina, colágeno tipo I e Runx-2 presentes nas culturas celulares.