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Validação da expressão diferencial de microRNAs em exossomos de sangue periférico de gestantes em trabalho de parto pré-termo e rotura prematura de membranas pré-termo e avaliação de mecanismos regulatórios

Processo: 16/01340-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de junho de 2016
Vigência (Término): 30 de setembro de 2019
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
Pesquisador responsável:Márcia Guimarães da Silva
Beneficiário:Bruna Ribeiro de Andrade Ramos
Instituição-sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Exossomos   Plasma (líquidos corporais)   MicroRNAs

Resumo

Introdução: O Trabalho de Parto Pré-termo (TPP) e a Rotura Prematura de Membranas Pré-Termo (RPM-PT) acarretam severas morbidades e mortalidade perinatais globalmente. MicroRNAs (miRNAs) podem influenciar o desfecho gestacional e são potenciais biomarcadores para estas complicações. Vesículas exossomais atuam na comunicação intercelular, podem conter miRNAs e agregar estabilidade a estas moléculas. Objetivo: Comparar a expressão, em vesículas exossomais de sangue periférico, dos miRNAs miR-15-5p, miR-143-3p, miR-145-5p, miR-199a-5p, miR-200c-3p, miR-223-3p, miR338-3p e miR-493-3p entre gestantes com desfecho a termo e gestantes com TPP e RPM-PT, e esclarecer possível mecanismos de ação destes miRNAs na fisiopatologia destas complicações. Pacientes e métodos: Estudo prospectivo controlado com mulheres com TPP, RPM-PT, parto a termo fora e em trabalho de parto e mulheres não gestantes, atendidas em Botucatu, SP. Exossomos do sangue periférico serão isolados e a expressão de miRNAs será realizada por Real Time PCR. Posteriormente, miR-mimics ou anti-miRs dos miRNAs diferencialmente expressos serão utilizados para desafiar culturas de membranas corioamnióticas. Os pellets e sobrenadantes das culturas serão utilizados para avaliação da expressão gênica (apenas pellets) e proteica de mRNAs preditos como alvos. Também será realizada a dosagem de IL-1², IL-6 e IL-8 nos sobrenadantes. Análise estatística será realizada respeitando os pressupostos determinados pelos resultados obtidos e o nível de significância adotado será de 5%. (AU)

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