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Caracterização de domínios enzimático e de lectina e os efeitos sobre receptores de células da imunidade inata

Processo: 16/00629-4
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de julho de 2016
Vigência (Término): 30 de junho de 2017
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Imunologia - Imunoquímica
Pesquisador responsável:Maria Cristina Roque Antunes Barreira
Beneficiário:Fabrício Freitas Fernandes
Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:13/04088-0 - Lectinas de patógenos, AP.TEM
Assunto(s):Paracoccidioides brasiliensis   Lectinas
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Lectina | N-acetilglicosaminidase | Paracoccidioides brasiliensis | Paracoccina | Glicobiologia

Resumo

A Paracoccidioidomicose (PCM), causada pelo fungo termodimórfico Paracoccidioides brasiliensis, é uma micose sistêmica crônica e granulomatosa. As manifestações da doença estão associadas a fatores relacionados com o hospedeiro e com o fungo; sendo assim, a interação entre as moléculas da superfície do fungo e receptores do sistema imunológico do hospedeiro levará a um tipo de resposta que pode ser benéfica ou prejudicial ao indivíduo infectado. Por este motivo, diferentes estudos são conduzidos para identificar proteínas antigênicas de P. brasiliensis que sejam importantes na interação patógeno-hospedeiro. A paracoccina é uma das proteínas candidatas em estudo. Esta proteína está localizada na superfície de leveduras, envolvida com processos de crescimento celular e virulência fúngica, e ainda, possui atividade imunológica protetora na PCM experimental. Visto a importância da atividade da paracoccina na modulação de uma resposta imunológica e seu papel na célula fúngica, torna-se mandatório caracterizar os domínios da paracoccina, buscando determinar a responsabilidade que cada um deles exerce sobre as atividades da molécula íntegra e identificar os seus ligantes. O presente projeto tem como objetivos clonar, expressar e purificar as paracoccinas deficientes dos domínios de lectina ou enzimático; identificar a especificidade do reconhecimento de paracoccina a diferentes carboidratos; identificar os sítios de N-glicosilação de TLR4 que são críticos para o reconhecimento pela paracoccina, por meio de mutações pontuais nestes sítios de N-glicosilação e expressão em células HEK; avaliar a participação dos domínios de lectina e enzimático na modulação da resposta imunológica in vitro e in vivo; e verificar a localização de paracoccina em estruturas de crescimento da célula fúngica, utilizando a técnica de expressão de proteínas fusionadas à GFP e DsRED, por meio da técnica de ATMT. (AU)

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Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
GONCALES, RELBER AGUIAR; RICCI-AZEVEDO, RAFAEL; VIEIRA, VANESSA C. S.; FERNANDES, FABRICIO F.; THOMAZ, SANDRA M. DE O.; CARVALHO, AGOSTINHO; VENDRUSCOLO, PATRICIA E.; CUNHA, CRISTINA; ROQUE-BARREIRA, MARIA CRISTINA; RODRIGUES, FERNANDO. Paracoccin Overexpression in Paracoccidioides brasiliensis Enhances Fungal Virulence by Remodeling Chitin Properties of the Cell Wall. Journal of Infectious Diseases, v. 224, n. 1, p. 164-174, . (14/22561-7, 17/02998-0, 13/04088-0, 18/21708-5, 16/00629-4)
FERNANDES, FABRICIO F.; OLIVEIRA, ALINE F.; LANDGRAF, TAISE N.; CUNHA, CRISTINA; CARVALHO, AGOSTINHO; VENDRUSCOLO, PATRICIA E.; GONCALES, RELBER A.; ALMEIDA, FAUSTO; DA SILVA, THIAGO A.; RODRIGUES, FERNANDO; et al. Impact of Paracoccin Gene Silencing on Paracoccidioides brasiliensis Virulence. MBIO, v. 8, n. 4, . (16/00629-4, 14/05359-0, 14/22561-7, 16/04877-2, 12/09611-0, 13/04088-0)
FABRÍCIO FREITAS FERNANDES; NAYLA S. PITANGUI; GABRIELA PERON; CLARISSA X. R. VALIM; VÍVIAN M. MAZUCATO; ALINE F. OLIVEIRA; THIAGO A. DA SILVA; MARIA-CRISTINA ROQUE-BARREIRA; ADEMILSON PANUNTO-CASTELO. Expression of Hsp60 and its cell location in Paracoccidioides brasiliensis. Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, v. 62, . (17/01390-8, 16/00629-4)
LANDGRAF, TAISE N.; COSTA, MARCELO V.; OLIVEIRA, ALINE F.; RIBEIRO, WANDER C.; PANUNTO-CASTELO, ADEMILSON; FERNANDES, FABRICIO F.. Involvement of Dihydrolipoyl Dehydrogenase in the Phagocytosis and Killing of Paracoccidioides brasiliensis by Macrophages. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 8, . (16/00629-4, 12/08552-0, 13/12278-3)

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