Mecanismos moleculares da dor na artrite: identificação de novos alvos para o desenvolvimento de fármacos

• Processo: 16/12128-0
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Vigência (Início): 01 de agosto de 2016
• Vigência (Término): 30 de setembro de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Convênio/Acordo: GlaxoSmithKline
• Pesquisador responsável: Catarina de Fatima Pereira Teixeira
• Beneficiário: Michelle Cristiane Búfalo
• Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/50040-4 - Rational approach for searching molecular targets involved in inflammatory events and cell survival, AP.PCPE
• Assunto(s): Dor Artrite Osteoartrite

Resumo

A modulação transcricional de genes relacionados a dor serão analisados por arrays de RT-PCR, em co-culturas de neuroesferas (neurônios, células das glia e células de Schwan) em 3D e células do microambiente da articulação (condrócitos, sinoviócitos e macrófagos). O modelo de co-cultura permite a modelagem in vitro do complexo ambiente de articulação e de nociceptores periféricos. As co-culturas serão submetidas a inflamação utilizando interleucina-6 (IL-6) e prostaglandina (PGE). A modulação da expressão de neuropeptídios e receptores conhecidos por estarem associados ao desenvolvimento da dor (NGF, BDNF, TRK) serão avaliadas por expressão gênica e análise de imunofluorescência em modelo 3D de neuroesferas. Subsequentemente, um painel de genes associados a dor inflamatória, hiper-excitabilidade neuronal, sensibilização e atividade neuronal espontânea serão analisados in vitro por meio da expressão gênica e western blotting para os seguintes alvos moleculares associados a dor: mu-opioid, DOR, mGluR, NR2B, TRP, CB1, FAAH, B2, ASIC, EP, COX, mPGEs, TNFR, P2X, NaV, TrKA, TrKB. Serão também avaliadas alterações de marcadores de atividade da medula espinhal relacionadas à dor crônica na artrite, por meio da análise de mediadores, receptores, canais e enzimas envolvidos neste processo, incluindo: EP, COX, mPGES, mGluR, NR2B, CCR, CXaCR1, P2x, T-type Ca2+. Marcadores de neuroinflamação (TNF, IL-1b), de modulação neuro-imune e controle neuronal do metabolismo ósseo (glutamato, subP, CGRP, GABA) serão também investigados. A via esfingomielina-ceramida envolvida na dor crônica e recentemente descrita e caracterizada por metabolômica sistêmica será também analisada na fase inicial deste projeto. A regulação ("up" e "down") dessas vias metabólicas, associada a alterações na formação de mielina e morte celular programada, bem como os efeitos causados pela ativação de astrócitos e a liberação de citocinas (IL-1 e MCP-1) envolvidas em inflamação e dor, serão também investigados. Subsequentemente, os alvos moleculares identificados poderão ser avaliados em modelos experimentais para a forma mais comum de artrite, denominada osteoartrite (AO). (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BUFALO, MICHELLE C.; ALMEIDA, MAIRA E.; FRANCA, ISABELLA ARAUJO; ZAMBELLI, VANESSA O.; SANT'ANNA, MORENA BRAZIL MARTINS; KIMURA, LOUISE F.; GIARDINI, ALINE CAROLINA; CURY, YARA; SAMPAIO, SANDRA COCCUZZO. Advanced glycation endproducts produced by in vitro glycation of type I collagen modulate the functional and secretory behavior of dorsal root ganglion cells cultivated in two-dimensional system. Experimental Cell Research, v. 382, n. 2-3, SEP 15 2019. (16/12128-0, 15/50040-4, 12/51241-5, 16/10886-4)