Análise do fluxo autofágico durante a agregação proteica contendo alfa-sinucleína e tau hiperfosforilada em cultura de células do hipocampo, substância negra e locus coeruleus

• Processo: 16/14513-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de setembro de 2016
• Vigência (Término): 31 de agosto de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Merari de Fátima Ramires Ferrari
• Beneficiário: Rafaela Regina Cardoso
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Autofagia Degeneração neural Hipocampo alfa-Sinucleína Locus cerúleo Substância negra Corantes fluorescentes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: agregação protéica | Autofagia | Hipocampo | Locus coeruleus | neurodegerenação | Substância negra | Neurodegeneração

Resumo

Alterações na estrutura e composição bioquímica das células, formação de placas senis e neurofibrilares são características comuns do encéfalo em processo degenerativo. Esses emaranhados neurofibrilares são constituídos essencialmente por proteína tau hiperfosforilada. A presença desses agregados proteicos leva a prejuízos intracelulares que culminam em morte celular. A falha nas vias de degradação celular pode favorecer a agregação de proteínas intra e extracelulares e culminar com a neurodegeneração. Desta forma, pretende-se analisar a formação e degradação dos autofagolisossomos e a co-localização dos autofagossomos com a tau hiperfosforilada e a alfa-sinucleína, a fim de estudar a relação do fluxo autofágico com a formação dos agregados proteicos. Para essa análise, serão empregadas sondas fluorescentes as quais marcam organelas ácidas com cores distintas dependendo da faixa do pH, bem como anticorpos específicos para a marcação da proteína tau hiperfosforilada e da alfa-sinucleína. O estudo será realizado em culturas primárias de células do hipocampo, substância negra e locus coeruleus submetidas a exposição a rotenona em concentrações de 0,3 a 1nM, sendo que esta última concentração já determina a presença de agregados proteicos contendo tau hiperfosforilada e alfa-sinucleína nas células de estudo.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SEMEANO, ANA T.; TOFOLI, FABIANO A.; CORREA-VELLOSO, JULIANA C.; DE JESUS SANTOS, ANA P.; OLIVEIRA-GIACOMELLI, AGATHA; CARDOSO, RAFAELA R.; PESSOA, MATEUS A.; DA ROCHA, EDROALDO LUMMERTZ; RIBEIRO, GUSTAVO; FERRARI, MERARI F. R.; et al. Effects of Magnetite Nanoparticles and Static Magnetic Field on Neural Differentiation of Pluripotent Stem Cells. STEM CELL REVIEWS AND REPORTS, v. 18, n. 4, p. 18-pg., 2022-03-24. (18/07366-4, 19/26852-0, 16/14513-8, 13/08028-1, 18/07592-4, 13/08135-2)