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Efeitos moduladores da atividade mitocondrial do cloridrato de meclizina, 2,4-dinitrofenol e metil-²-ciclodextrina associados com a fosfoetanolamina sintética em linhagem de câncer de mama triplo negativo

Processo: 16/15596-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de março de 2017
Vigência (Término): 29 de fevereiro de 2020
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina
Pesquisador responsável:Durvanei Augusto Maria
Beneficiário:Manuela Garcia Laveli da Silva
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Auxílio(s) vinculado(s):18/25191-7 - Cloridrato de meclizina e metil beta ciclodestrina associado ao monofosfoester fosfoetanolamina sintética modulam o potencial proliferativo de células de câncer de mama triplo negativo, PUB.ART
Assunto(s):Neoplasias de mama triplo negativas

Resumo

O câncer de mama é o segundo tipo de câncer mais letal para as mulheres em todo o mundo, apesar das diversas abordagens convencionais como a radioterapia, quimioterapia e a terapia hormonal. A resistência de células tumorais à quimioterapia constitui um importante obstáculo clínico para o sucesso da terapia do câncer. Os tumores de mama triplo-negativos são mais agressivos que outros subtipos de câncer de mama humana, além de serem tumores que apresentam maior disseminação para órgãos sólidos, como fígado e pulmão, e em séries mais recentes observa-se maior incidência de metástases cerebrais. A Fosfoetanolamina sintética é uma molécula fosforilada artificialmente, o que a torna diferente das moléculas atuais por seu nível de absorção de aproximadamente 90%, com propriedades antiinflamatórias e pró-apoptóticas. Cloridrato de meclizina é um anti-histamínico utilizado contra náusea e vertigem, assim como muitos anti-histamínicos possui atividade anticolinérgica. 2,4-Dinitrofenol é um desacoplador químico que age na redução do potencial de membrana mitocondrial, sem modificar a síntese de ATP. Metil-²-ciclodextrina pertence a família ²-ciclodextrina, sendo capaz de remover o colesterol da membrana plasmática. Os efeitos sobre a mitocôndria causados pela Pho-s associada aos compostos na linhagem tumoral serão avaliados por meio do teste colorimétrico MTT e a obtenção da IC50%. Será avaliada a produção de radicais livres lipoperoxidados pelo teste LPO e será quantificada a produção de ROS. As alterações nas vias de morte celular serão avaliadas por citometria de fluxo. As alterações nas estruturas celulares por microscopia eletrônica de transmissão e confocal a laser. Marcação das vesículas lisossomais pelo acridine-orange e avaliação do potencial elétrico mitocondrial por meio da sonda rodamina-123 e pela sonda JC-1. O arranjo do citoesqueleto pela marcação com faloidina-FITC. A caveolina-1 será marcada e avaliada pelo anticorpo anti-caveolina1. Os níveis de produção ATP e ADP serão mensurados por meio do kit ATP/ADP (Sigma-Aldrich).