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Desenvolvimento de uma linhagem mutante da mosca da bicheira para o co-receptor olfativo utilizando o sistema CRISPR/Cas9: uma investigação funcional acerca da evolução da percepção olfativa na família Calliphoridae

Processo: 17/05432-7
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
Vigência (Início): 23 de maio de 2017
Vigência (Término): 22 de maio de 2018
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Ana Maria Lima de Azeredo-Espin
Beneficiário:Daniel Fernando Paulo
Supervisor no Exterior: Owen William Mcmillan
Instituição-sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Local de pesquisa : Smithsonian Institution, Panamá, Panamá  
Vinculado à bolsa:14/15042-3 - Análise do perfil de expressão de microRNAs em diferentes fases do desenvolvimento da mosca da bicheira Cochliomyia hominivorax (Diptera: Calliphoridae), BP.DR
Assunto(s):Genômica funcional   Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas   Proteína 9 associada à CRISPR   Cochliomyia hominivorax

Resumo

Identificar as regiões genômicas subjacentes à radiação adaptativa de insetos, é um dos principais objetivos da biologia evolutiva moderna. O surgimento do parasitismo obrigatório na família Calliphoridae têm sido tema de debate científico há mais de meio século, gerando a necessidade de estudos sobre como a arquitetura genômica está associada a transições ecológicas adaptativas. Estudos anteriores sugeriram que essa estratégia surgiu duas vezes na linhagem de Calliphoridae, possivelmente para evitar competição por recursos. Contudo, as bases moleculares subjacentes à transição de um hábito saprófago para um hábito parasítico obrigatório nessas espécies permanecem desconhecidas. Nosso grupo de pesquisa acredita que o olfato poderia ter desempenhado um papel crítico nesta adaptação. Para iniciar essa investigação, este projeto propõe a caracterização funcional do co-receptor olfativo Orco da mosca da bicheira, Cochiomyia hominivorax, usando o mais novo e poderoso sistema de edição-genômica CRISPR/Cas9 para nocautear este gene. Orco codifica um co-receptor que dimeriza com todos os Receptores de Odor (ORs) sendo necessário para a via de percepção olfativa mediada pelos ORs. Após nocautear o gene ChomOrco, iremos estabelecer uma linhagem mutante estável, que carece funcionalmente da família gênica ORs. Este projeto objetiva principalmente o estabelecimento do sistema CRISPR para a espécie C. hominivorax, fornecendo também informações importantes sobre os estímulos olfativos associados ao parasitismo em Calliphoridae, gerando o primeiro perfil de respostas mediadas pelos receptores olfatórios em C. hominivorax.

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
PAULO, DANIEL F.; WILLIAMSON, MEGAN E.; ARP, ALEX P.; LI, FANG; SAGEL, AGUSTIN; SKODA, STEVEN R.; SANCHEZ-GALLEGO, JOEL; VASQUEZ, MARIO; QUINTERO, GLADYS; PEREZ DE LEON, ADALBERTO A.; BELIKOFF, ESTHER J.; AZEREDO-ESPIN, ANA M. L.; OWEN MCMILLAN, W.; CONCHA, CAROLINA; SCOTT, MAXWELL J. Specific Gene Disruption in the Major Livestock Pests Cochliomyia hominivorax and Lucilia cuprina Using CRISPR/Cas9. G3-GENES, GENOMES, GENETICS, v. 9, n. 9, p. 3045-3055, SEP 2019. Citações Web of Science: 0.

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