Caracterização da quinase ATR de Leishmania major e de seu papel na sinalização do estresse no processo de replicação do DNA

• Processo: 16/16454-9
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Vigência (Início): 01 de abril de 2017
• Situação: Interrompido
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Luiz Ricardo Orsini Tosi
• Beneficiário: Gabriel Lamak Almeida da Silva
• Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 16/50050-2 - How do common and diverged features of the replicative stress response shape the biology of TriTryp parasites?, AP.TEM
• Bolsa(s) vinculada(s): 19/20731-6 - Caracterização da quinase ATR de Leishmania major e de seu papel na sinalização do estresse no processo de replicação do DNA, BE.EP.DD
• Assunto(s): Biologia molecular Leishmania major Replicação do DNA Dano ao DNA Reparo do DNA Técnicas de silenciamento de genes

Resumo

Pouco se sabe sobre a contribuição da quinase ATR na homeostase do genoma de eucariotos primitivos, como os tripanossomatídeos. Em eucariotos superiores a ATR atua na sinalização de estruturas danificadas do DNA principalmente pela fosforilação de Chk1 e consequente parada do ciclo celular. O objetivo central deste projeto é investigar a conservação da quinase ATR em Leishmania e explorar sua contribuição para a sinalização do estresse no processo de replicação do DNA. Os resultados esperados incluem a determinação da distribuição de ATR e seu envolvimento na progressão do ciclo celular em células sob estresse replicativo. Esperamos também analisar o efeito de níveis alterados de ATR (super-expressão ou knock-down) na sinalização do estresse replicativo e na estabilidade do genoma do parasito. O tamanho incomum do gene da ATR (9,6 Kb) limita as possibilidades de manipulação genética do parasito usando estratégias já estabelecidas. Por isso, propomos também o desenvolvimento de uma estratégia que combina os sistemas DiCre-recombinase e CRISPR/cas9 para o nocaute condicional de ATR. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DAMASCENO, JEZIEL D.; OBONAGA, RICARDO; SILVA, GABRIEL L. A.; REIS-CUNHA, JOAO L.; DUNCAN, SAMUEL M.; BARTHOLOMEU, DANIELLA C.; MOTTRAM, JEREMY C.; MCCULLOCH, RICHARD; TOSI, LUIZ R. O. Conditional genome engineering reveals canonical and divergent roles for the Hus1 component of the 9-1-1 complex in the maintenance of the plastic genome of Leishmania. Nucleic Acids Research, v. 46, n. 22, p. 11835-11846, DEC 14 2018. Citações Web of Science: 2.