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Expressão gênica condicional em P. falciparum

Processo: 17/05622-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de maio de 2017
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2017
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
Pesquisador responsável:Mauro Ferreira de Azevedo
Beneficiário:Caroline Lima dos Santos
Instituição-sede: Instituto de Saúde e Sociedade (ISS). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Baixada Santista. Santos , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:15/19316-3 - Mecanismos de egresso em P. falciparum: identificação de novos alvos terapêuticos, AP.JP
Assunto(s):Plasmodium falciparum   Malária   Luciferases   Genética reversa   Expressão gênica

Resumo

A possibilidade de modificar loci gnômicos para que os genes de interesse sejam expressos de forma condicional, além da expressão exógena de transgenes de forma regulada, tem permitido o estudo da função de genes que são essenciais a P. falciparum durante o ciclo eritrocítico. No entanto, esta tecnologia ainda apresenta algumas limitações, sendo uma das principais a baixa regulação da expressão genica. Este "vazamento" de expressão em condições onde o gene deveria estar silenciado permite que seu produto mantenha a atividade, inviabilizando estudos que se baseiem na análise do fenótipo resultante da perda de função. A combinação de diferentes sistemas, baseados na regulação da estabilidade da proteína ou do transcrito, pode permitir um silenciamento mais eficaz da expressão do gene de interesse e viabilizar estudos funcionais. Este projeto terá por objetivo testar esta hipótese, determinando se a combinação de sistemas permite uma melhor regulação. A estratégia se baseará na modificação de plasmídeos repórteres, transfecção transiente em P. falciparum, cultivo na presença dos ligantes específicos e quantificação da expressão do gene repórter através da atividade da Nanoluciferase (Nluc). (AU)