PfGCaMP3 como uma nova ferramenta para estudar a sinalização de Ca2+ no parasita da Malária humana Plasmodium falciparum

• Processo: 16/14411-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2017
• Data de Término da vigência: 21 de junho de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Célia Regina da Silva Garcia
• Beneficiário: Lucas Borges Pereira
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 11/51295-5 - Genômica funcional em Plasmodium, AP.TEM
• Assunto(s): Malária Plasmodium falciparum Parasitos Organismos geneticamente modificados Mitocôndrias Fatores de necrose tumoral Citocinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Gametocitos | GCaMP3 | Plasmodium falciparum | sinalização de cálcio | Tnf | Sinalização celular

Resumo

Os estudos de sinalização de Ca2+ em P. falciparum publicados até o momento utilizaram moléculas orgânicas na medição das variações na concentração de Ca2+ no citoplasma do parasita, entretanto tais moléculas possuem desvantagens e sérias limitações. Buscando sanar este impasse nós criamos uma linhagem de parasitas transgênicos (PfGCaMP3) capazes de monitorar as oscilações de Ca2+ no parasita sem a necessidade de prévia marcação com moléculas orgânicas. O objetivo deste projeto é avançar no estudo acerca da sinalização de Ca2+ em P. falciparum, utilizando para este fim, parasitas transgênicos PfGCaMP3. Entre as metas propostas estão a de utilizar tais parasitas no screening de potenciais moléculas antimaláricas presentes em bibliotecas de compostos, como também estudar a sinalização de Ca2+ que ocorre nos gametócitos, estudo este pioneiro nesta fase do ciclo do parasita. Adicionalmente propomos decifrar o mecanismo de atuação de TNF (Fator de Necrose Tumoral) no ciclo intraeritrocítico de P. falciparum, visto que resultados prévios de nosso grupo reportam uma diminuição da parasitemia e um aumento da concentração intracelular de Ca2+ no parasita após tratamento com esta citocina. Neste sentido, avaliaremos os efeitos de TNF na parasitemia e modulação de PfPCNA1 na linhagem knockout para PfeIK1. Por fim avaliaremos se o tratamento com TNF é capaz de afetar a mitocôndria de P. falciparum, relacionando assim a participação desta organela e o comportamento dual desta citocina. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BORGES-PEREIRA, LUCAS; DIAS, BARBARA K. M.; SINGH, MANEESH KUMAR; GARCIA, CELIA R. S.. Malaria parasites and circadian rhythm: New insights into an old puzzle. CURRENT RESEARCH IN MICROBIAL SCIENCES, v. 2, p. 3-pg., 2021-12-01. (17/08684-7, 18/07177-7, 16/14411-0, 19/09490-7)

BORGES-PEREIRA, LUCAS; THOMAS, SAMANTHA J.; DOS ANJOS E SILVA, AMANDA LAIZY; BARTLETT, PAULA J.; THOMAS, ANDREW P.; GARCIA, CELIA R. S.. The genetic Ca2+ sensor GCaMP3 reveals multiple Ca2+ stores differentially coupled to Ca2+ entry in the human malaria parasite Plasmodium falciparum. Journal of Biological Chemistry, v. 295, n. 44, p. 14998-15012, OCT 30 2020. (18/07177-7, 16/13590-9, 16/14411-0, 17/08684-7)