Investigação da expressão de genes, relacionados às proteínas identificadas por meio do estudo sobre proteoma salivar precedente, em indivíduos com Diabetes Mellitus tipo 2, Dislipidemia e Doença Periodontal Crônica

• Processo: 17/10317-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de julho de 2017
• Vigência (Término): 31 de dezembro de 2017
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Periodontia
• Pesquisador responsável: Sâmia Cruz Tfaile Corbi
• Beneficiário: Maria Letícia Verdi Emílio
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Saliva Genética Expressão gênica Doenças periodontais Dislipidemias Diabetes mellitus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Análise de proteoma | diabetes mellitus | dislipidemias | doença periodontal | expressão gênica | saliva | Genética

Resumo

O objetivo deste estudo é investigar a expressão dos genes PIGR (Receptor de Imunoglobulina Polimérica) e LCP1 (Plastin-2), os quais estão relacionados às proteínas salivares identificadas no estudo precedente sobre o Proteoma Salivar, em pacientes com diabetes mellitus tipo 2 (compensado/descompensado metabolicamente), dislipidemia e periodontite crônica. O desenvolvimento do presente estudo visa complementar o recém-concluído Pós-Doutorado no exterior da candidata à orientação deste projeto, apoio FAPESP (Bolsa Pós-Doutorado BEPE - Canadá: 2015/08678-1) e que atualmente realiza Pós-Doutorado no Brasil sob supervisão da Profa. Dra. Raquel M. Scarel Caminaga (Bolsa Pós-Doutorado - Brasil: 2014/16148-0), o qual avaliou o Proteoma Salivar e Plasmático de indivíduos apresentando ou não simultaneamente essas três patologias, utilizando identificação, caracterização e quantificação das proteínas mais/menos abundantes por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE, 12%) seguida de Cromatografia Líquida por Fase Reversa e Cromatografia Líquida Tandem em Espectrometria de Massas (LC-ESI-MS/MS). Foram investigados 5 grupos de pacientes (com 30 pacientes cada): Grupo 1- Indivíduos acometidos por DM2, descompensados metabolicamente (HbA1c e 8,0%), com dislipidemia e com DP; Grupo 2- Indivíduos com DM2, compensados metabolicamente (HbA1c < 8,0%), com dislipidemia e com DP; Grupo 3- Indivíduos sem DM2, com dislipidemia e com DP; Grupo 4- Indivíduos sem DM2, sem dislipidemia e com DP; Grupo 5- Indivíduos sem DM2, sem dislipidemia e sem DP. Considerando o Proteoma Salivar desses indivíduos, obteve-se como resultado final a identificação e caracterização de algumas proteínas, dentre estas as proteínas Receptor de Imunoglobulina Polimérica e Plastin-2, as quais estão relacionadas à resposta imune e organização celular. Além disso, os resultados referentes à quantificação de abundância relativa mostraram que estas duas proteínas salivares estão em maior abundância nos grupos de indivíduos doentes comparados ao grupo dos indivíduos saudáveis (Grupo Controle) - resultados estão sendo finalizados para publicação em periódicos internacionais. Todos os pacientes, dos cinco grupos, foram submetidos a exame periodontal completo, exame físico e avaliação bioquímica dos perfis glicêmico e lipídico. De cada paciente foi coletado sangue, sendo extraído o RNA total. Neste presente projeto será confeccionado o cDNA de todas as amostras dos 5 diferentes Grupos de indivíduos para investigação da expressão dos genes PIGR e LCP1 por meio de PCR em Tempo Real (qPCR) utilizando o sistema TaqMan. É importante realizar este presente estudo, pois a expressão desses genes relacionados às proteínas identificadas como diferencialmente abundantes em cada condição, poderão ser investigados como novos alvos terapêuticos, além de serem úteis para o diagnóstico e acompanhamento clínico dos pacientes acometidos por essas patologias. Adicionalmente, também se espera contribuir para a elucidação dos mecanismos moleculares envolvidos nessas doenças, nos permitindo melhor compreender a possível inter-relação de vários genes importantes e sua influência no perfil glicêmico, lipídico e periodontal dos pacientes com as mencionadas patologias. (AU)