O Papel da Metilação na Iniciação e Progressão do Melanoma e o Impacto Epigenético in vitro

• Processo: 17/09612-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Vigência (Início): 06 de novembro de 2017
• Vigência (Término): 05 de novembro de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Vinicius de Lima Vazquez
• Beneficiário: Anna Luiza Silva Almeida Vicente
• Supervisor: Zdenko Herceg
• Instituição Sede: Hospital do Câncer de Barretos. Fundação Pio XII (FP). Barretos , SP, Brasil
• Local de pesquisa: International Agency for Research on Cancer (IARC), França
• Vinculado à bolsa: 16/15941-3 - O Papel da Metilação na Iniciação e Progressão do Melanoma e o Impacto Epigenético in vitro., BP.DR
• Assunto(s): Melanoma Epigenômica Epigênese genética Metilação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: epigenética | melanoma | metilação | Epigenética - Melanoma

Resumo

Nos últimos anos há um esforço mundial para caracterizar as principais alterações moleculares associadas à patogênese do melanoma. Assim, foi possível criar fármacos específicos em mecanismos de ação moleculares, com impacto na sobrevida dos pacientes. O TCGA (The Cancer Genome Atlas), que realizou a maior análise de metilação neste tipo tumoral, incluiu 80% de amostras metastáticas, o que limita o entendimento das alterações epigenéticas envolvidas na iniciação e progressão do melanoma, embora, este e outros estudos corroborem para a importância deste tipo de evento na tumorigênese, e seu possível papel como alvo molecular e biomarcador prognóstico e de resposta a tratamento. O Grupo de Pesquisa em Melanoma do Hospital de Câncer de Barretos, que atualmente realizada o whole genomic sequencing de 100 amostras (43% tumores primários e 57% metastáticos) no contexto do International Cancer Genome Consortium (ICGC), objetiva realizar o metiloma destas amostras e associar os eventos epigenéticos aos genéticos para a compreensão da história natural do melanoma. Para isto, validaremos 5 genes alvos do metiloma em 300 pacientes, sendo 100 primários, 100 metástases linfonodais e 100 metástases à distância, além de 40 nevos. Confirmaremos a regulação epigenética dos 5 genes por meio de Imunohistoquímica em Tissue Microarray (TMA). Em seguida, realizaremos a modulação do gene pela técnica de CRISPR-Cas9 (silenciamento) ou utilizando plasmídeo (superexpressão) em duas linhagens estabelecidas e uma primária de melanoma. Por fim, investigaremos se essa modulação possui impacto na capacidade tumorigênica, de proliferação, migração e invasão celular destas linhagens.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SILVA ALMEIDA VICENTEL, ANNA LUIZA; BIANCHINI, RAQUEL ALVES; LAUS, ANA CAROLINA; MACEDO, GRAZIELA; REIS, RUI MANUEL; VAZQUEZ, VINICIUS DE LIMA. Comparison of protocols for removal of melanin from genomic DNA to optimize PCR amplification of DNA purified from highly pigmented lesions. HISTOLOGY AND HISTOPATHOLOGY, v. 34, n. 9, p. 1089-1096, SEP 2019. (17/09612-0, 12/04194-1, 16/15941-3)