Resumo
A cromatografia por injeção sequencial (SIC, do inglês Sequential Injection Chromatography) utiliza colunas cromatográficas operadas a baixas pressões acopladas a sistemas de análises por injeção sequencial. A capacidade de separação em SIC pode ser aumentada com o desenvolvimento de novas fases estacionárias mais seletivas, disponíveis como colunas monolíticas. A introdução das fases estacionárias monolíticas significou um avanço na tecnologia de colunas cromatográficas, por apresentar vantagens como (i) alta permeabilidade, que possibilita altas vazões de fase móvel sob menores pressões de trabalho, (ii) grande variabilidade de precursores disponíveis para o preparo de novas fases estacionárias, (iii) simples processos de preparação e (iv) alta resistência mecânica. A cromatografia de interação hidrofílica, HILIC (do inglês, Hydrophilic Interaction Chromatography), é uma combinação dos modos de separação fase normal, fase reversa e cromatografia iônica, porque emprega fases estacionárias altamente hidrofílicas, típicas daquelas utilizadas na cromatografia normal, tais como sílica não derivatizada ou quimicamente modificada com grupos polares (e.g. amino, ciano, diol ou polióis). Além disso, HILIC aplica solventes orgânicos polares e suas misturas, utilizados comumente como fases móveis para cromatografia em fase reversa, e é capaz de separar facilmente os compostos visados por cromatografia iônica, como aqueles polares ionizáveis ou ionizados. O desenvolvimento de sistemas de separação multidimensionais é uma alternativa em SIC, por explorar dimensões cromatográficas baseadas em diferentes mecanismos de separação. Quando a amostra é submetida à separação por mecanismos diferentes, ou complementares, intrinsicamente obtém-se um maior poder de separação e distribuição dos analitos, aumentando o poder de resolução. Por este motivo, fases estacionárias para uso no modo HILIC são usuais na combinação com fases estacionárias tradicionais de modo fase reversa em separações cromatográficas bidimensionais ortogonais, pois é eliminada a incompatibilidade de fases móveis entre dois modos de eluição. Além disso, analitos polares, que apresentam baixa eficiência de separação em fase reversa, podem ser separados com sucesso em fases estacionárias hidrofílicas para HILIC.
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