Desenvolvimento de novas estratégias de diagnóstico sorológico para tipagem da infecção prévia pelo vírus Dengue

• Processo: 17/09661-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Vigência (Início): 01 de setembro de 2017
• Vigência (Término): 31 de março de 2019
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Luis Carlos de Souza Ferreira
• Beneficiário: Samuel Santos Pereira
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Testes imunológicos Sorotipagem Técnicas e procedimentos diagnósticos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: diagnóstico | Ns1 | Sorotipagem | Virus dengue | Imunodiagnóstico

Resumo

O vírus Dengue (DENV) pertence à família Flaviviridae, gênero flavivírus, sendo o agente causador da dengue, enfermidade de grande impacto na saúde pública mundial. São conhecidos quatro sorotipos de DENV (1, 2, 3 e 4) capazes de infectar humanos, sendo grande parte das manifestações clínicas semelhantes entre os sorotipos, o que dificulta a diferenciação entre eles tendo por base somente exames clínicos. Além disso, a cocirculação com os vírus Zika e da Febre Amarela, que possuem parentesco evolutivo e semelhança antigênica com o DENV, constitui uma dificuldade no estabelecimento de ensaios de sorodiagnóstico específico para o vírus Dengue. A diferenciação sorológica entre os quatro sorotipos do DENV ainda permanece desafiadora, sendo essencial na determinação da epidemiologia desta infecção e no manejo dos pacientes infectados. Assim, o objetivo deste projeto é desenvolver e caracterizar estratégias de diagnóstico sorológico específico para o vírus da dengue, baseadas em fragmentos da proteína não estrutural 1 (NS1) de cada sorotipo do DENV, que sejam capazes de diferenciar sorologicamente entre a infecção prévia pelos quatro sorotipos do vírus. Para atingir este objetivo, fragmentos das proteínas NS1 recombinantes (referentes aos aminoácidos 250-352 de cada sorotipo do vírus DENV) serão expressas em sistemas procariotos e posteriormente purificadas por cromatografia de afinidade. Os antígenos produzidos serão avaliados quanto ao potencial para aplicação em ensaios sorológico na plataforma de ELISA, identificando, principalmente, a especificidade e a preservação da antigenicidade dos mesmos. As diferenças estruturais entre as variantes da NS1250-352 dos vírus Dengue serão avaliadas em ensaio de dicroísmo circular. Por fim, os antígenos purificados serão empregados em padronizações de ensaios de ELISA, com a finalidade de estabelecer estratégias capazes de sorotipar a infecção prévia pelos diferentes sorotipos de DENV. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

PEREIRA, LENNON RAMOS; DOS SANTOS ALVES, RUBENS PRINCE; SALES, NATIELY SILVA; ANDREATA-SANTOS, ROBERT; VENCESLAU-CARVALHO, ALEXIA ADRIANNE; PEREIRA, SAMUEL SANTOS; CASTRO-AMARANTE, MARIA FERNANDA; RODRIGUES-JESUS, MONICA JOSIANE; DE PINHO FAVARO, MARIANNA TEIXEIRA; CHURA-CHAMBI, ROSA MARIA; et al. Enhanced Immune Responses and Protective Immunity to Zika Virus Induced by a DNA Vaccine Encoding a Chimeric NS1 Fused With Type 1 Herpes Virus gD Protein. FRONTIERS IN MEDICAL TECHNOLOGY, v. 2, p. 14-pg., 2020-12-03. (14/17595-0, 16/20045-7, 16/23560-0, 18/14459-9, 16/05570-8, 18/08199-4, 17/09661-0, 16/14344-1)

PEREIRA, SAMUEL SANTOS; ANDREATA-SANTOS, ROBERT; PEREIRA, LENNON RAMOS; SOARES, CAMILA PEREIRA; FELIX, ALVINA CLARA; JUNGMANN CARDOSO DE ANDRADE, PATRICIA DE MELLO; DURIGON, EDISON LUIS; ROMANO, CAMILA MALTA; DE SOUZA FERREIRA, LUIS CARLOS. NS1-based ELISA test efficiently detects dengue infections without cross-reactivity with Zika virus. INTERNATIONAL JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES, v. 112, p. 202-204, SEP 2021. (17/09661-0, 16/05570-8, 16/20045-7)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

PEREIRA, Samuel Santos. Desenvolvimento de novas estratégias de diagnóstico sorológico para tipagem da infecção prévia pelo vírus Dengue.. 2019. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.