A proteína UXT, um regulador da via NF-kB, é um substrato canônico da E3 ubiquitina-ligase SCF(Fbxo7)?

• Processo: 17/07879-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2017
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Felipe Roberti Teixeira
• Beneficiário: Valentine Spagnol
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): NF-kappa B Ubiquitinas Isoformas de proteínas Bioquímica celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: E3 ubiquitina-ligase | Fbxo7 | NF-kB | Uxt | Bioquímica Celular

Resumo

A via de sinalização do NF-kB é responsável pelo controle de importantes eventos celulares, tais como proliferação celular, diferenciação, apoptose e reposta imune. Nesse contexto, a proteína UXT (ubiquitously expressed transcript) é um componente do enhanceossoma transcricional de NF-kB, sendo essencial para ativação desta via. Seu knockdown atenua drasticamente a expressão de genes dependentes deste fator transcricional. Recentemente, nosso grupo de pesquisa em colaboração com a University of Cambridge/UK (Dr Heike Laman- Department of Pathology) verificou que UXT foi ubiquitinada in vitro pela E3 ubiquitina-ligase SCF(Fbxo7) em experimentos utilizando microarranjos de proteínas como fonte de substratos (protoarrays), o que nos chamou atenção, já que Fbxo7 é um regulador negativo da via NF-kB por promover a poliubiquitinação de cIAP e TRAF2, como já publicado. Resultados prévios do nosso grupo sugeriram que Fbxo7 interage e ubiquitina in vivo a proteína UXT através de cadeias de ubiquitina via K63 (regulação de função) e K48 (direcionador para degradação proteassomal). No entanto, estes resultados ainda não foram validados e as consequências funcionais desta ubiquitinação não foram investigadas em termos de estabilidade de UXT na presença ou ausência de Fbxo7. Além disso, foi relatada uma segunda isoforma de UXT (UXT-V1), mais longa em 12 resíduos N-terminais, com meia vida curta que protege as células contra apoptose através da ligação a TRAF2 e, assim, previne a formação do complexo TRA2-RIP-TRAD do recrutamento de FADD e caspase-8. Nenhum estudo até o momento avaliou a interação e ubiquitinação da UXT-V1 por Fbxo7. Sendo assim, este projeto tem o objetivo de avaliar a ubiquitinação das isoformas UXT-V1 e UXT-V2 por SCF(Fbxo7) e as consequências funcionais desta modificação pós-traducional em termos de estabilidade de UXT na presença ou ausência de FBXO7. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DORES-SILVA, PAULO ROBERTO; RODRIGUES KIRALY, VANESSA THOMAZ; DE OLIVEIRA MORITZ, MILENE NOBREGA; BALASCO SERRAO, VITOR HUGO; SIQUEIRA DOS PASSOS, PATRICIA MARIA; SPAGNOL, VALENTINE; TEIXEIRA, FELIPE ROBERTI; GAVA, LISANDRA MARQUES; CAUVI, DAVID MARIO; INACIO RAMOS, CARLOS HENRIQUE; et al. New insights on human Hsp70-escort protein 1: Chaperone activity, interaction with liposomes, cellular localizations and HSPA's self-assemblies remodeling. International Journal of Biological Macromolecules, v. 182, p. 772-784, JUL 1 2021. (07/05001-4, 14/16646-0, 14/07206-6, 17/26131-5, 16/25798-3, 09/54216-9, 12/50161-8, 17/07879-9, 11/23110-0, 17/07335-9, 04/08868-0, 12/23730-1)

SPAGNOL, VALENTINE; OLIVEIRA, CAIO A. B.; RANDLE, SUZANNE J.; PASSOS, PATRICIA M. S.; CORREIA, CAMILA R. S. T. B.; SIMAROLI, NATALIA B.; OLIVEIRA, JOICE S.; MEVISSEN, TYCHO E. T.; MEDEIROS, ANA CARLA; GOMES, MARCELO D.; et al. The E3 ubiquitin ligase SCF(Fbxo7) mediates proteasomal degradation of UXT isoform 2 (UXT-V2) to inhibit the NF-kappa B signaling pathway. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-GENERAL SUBJECTS, v. 1865, n. 1, JAN 2021. (16/25798-3, 16/21310-6, 16/00792-2, 17/22153-4, 17/07879-9, 18/09204-1, 19/03943-0, 18/01308-2)