Análise da expressão da proteína de matriz extracelular Agrin no processo de diferenciação osteoblástica

• Processo: 17/20349-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2018
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Cirurgia Buco-maxilo-facial
• Pesquisador responsável: Adalberto Luiz Rosa
• Beneficiário: Denise Weffort
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Osteoblastos Cultura de células Diferenciação celular Expressão gênica Expressão de proteínas Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: agrin | cultura de células | diferenciação | Osso | osteoblasto | Cirurgia Buco-Maxilo-Facial

Resumo

Agrin é uma proteína de matriz extracelular que tem sido investigada principalmente por sua expressão em diversos tecidos e envolvimento em vários processos biológicos. Dentre eles, Agrin também foi detectada em condrócitos e foi demonstrado seu papel relevante no desenvolvimento do sistema esquelético. No entanto, até o momento, há pouca informação na literatura acerca da expressão de Agrin e sua função em osteoblastos. Portanto, os objetivos do presente estudo são: (1) avaliar a expressão gênica e proteica de Agrin durante o processo de diferenciação osteoblástica e (2) investigar uma possível correlação entre expressão de Agrin e grau de diferenciação osteoblástica. Para isso, três modelos de cultura de células de camundongos serão utilizados: (1) células-tronco mesenquimais de medula óssea, (2) células de calvária e (3) células imortalizadas da linhagem osteoblástica MC3T3-E1. Essas células serão cultivadas em condições osteogênicas e ao final de 3, 5, 7, 10 e 14 dias será avaliada a expressão gênica de Agrin por PCR em tempo real e ao final de 5, 7 e 10 dias, a expressão proteica de Agrin por Western blot. Adicionalmente, com vistas a investigar uma correlação entre expressão de Agrin e grau de diferenciação osteoblástica, serão avaliadas a expressão gênica de osteocalcina nos mesmos períodos mencionados para a expressão gênica de Agrin e a atividade in situ de fosfatase alcalina por marcação com Fast red, aos 10 dias. Os dados numéricos serão submetidos ao teste de aderência à curva de distribuição normal para a definição da análise estatística, paramétrica ou não-paramétrica, a ser empregada. Os resultados desse estudo poderão gerar dados importantes para direcionar futuras investigações acerca da função da Agrin no tecido ósseo e, possivelmente, para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas para a regeneração óssea. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SOUZA, ALANN THAFFARELL PORTILHO; LOPES, HELENA BACHA; OLIVEIRA, FABIOLA SINGARETTI; WEFFORT, DENISE; FREITAS, GILEADE PEREIRA; ADOLPHO, LETICIA FAUSTINO; FERNANDES, ROGER RODRIGO; ROSA, ADALBERTO LUIZ; BELOTI, MARCIO MATEUS. The extracellular matrix protein Agrin is expressed by osteoblasts and contributes to their differentiation. Cell and Tissue Research, v. 386, n. 2, JUL 2021. (16/14171-0, 17/20349-9)

SOUZA, ALANN THAFFARELL PORTILHO; FREITAS, GILEADE PEREIRA; LOPES, HELENA BACHA; TOTOLI, GABRIELA GUARALDO CAMPOS; TARONE, ADRIANA GADIOLI; MAROSTICA-JUNIOR, MARIO ROBERTO; ROSA, ADALBERTO LUIZ; BELOTI, MARCIO MATEUS. Jabuticaba peel extract modulates adipocyte and osteoblast differentiation of MSCs from healthy and osteoporotic rats. JOURNAL OF BONE AND MINERAL METABOLISM, v. 39, n. 2, SEP 2020. (15/13320-9, 17/20349-9, 18/11069-5, 15/50333-1, 17/12622-7)