Proteoma da película adquirida e saliva em voluntários com refluxo gastresofágico com erosão dentária ou não e avaliação in vitro do potencial protetor da hemoglobina contra a erosão dentária

• Processo: 17/17977-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2021
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Odontologia Social e Preventiva
• Pesquisador responsável: Marília Afonso Rabelo Buzalaf
• Beneficiário: Tatiana Martini
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
• Assunto(s): Bioquímica Erosão dentária Hemoglobinas Película adquirida
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: erosão dentária | hemoglobina | película adquirida | Bioquímica

Resumo

O objetivo deste trabalho será comparar o perfil proteico das películas adquiridas do esmalte (PAE) formadas na superfície lingual/palatina in vivo, bem como da saliva, em pacientes portadores de doença do refluxo gastroesofágico (DRGE) com lesões de erosão dentária, pacientes portadores de DRGE sem lesões de erosão dentária e pacientes controle (sem DRGE e erosão dentária), bem como avaliar o potencial protetor da modificação da película adquirida do esmalte com diferentes concentrações de hemoglobina contra a erosão dentária inicial in vitro, já que em experimentos preliminares do nosso grupo foi observada uma expressão aumentada de subunidades distintas de hemoglobina (Hb) no grupo DRGE sem erosão dentária em comparação com o grupo DRGE com erosão dentária. Na etapa in vivo haverá 3 braços paralelos, no qual 24 voluntários serão divididos em 3 grupos, a saber: a) pacientes portadores de DRGE e erosão dentária (BEWE e 9 ou grau 3 no sextante anterior superior (com todos os incisivos afetados); b) pacientes portadores de DRGE e sem erosão dentária (BEWE = 0); c) pacientes controle (sem DRGE e BEWE = 0). Será feita uma profilaxia dentária com pedra pomes. Depois de 120 min e após a formação PAE, os dentes serão isolados com rolos de algodão a película será coletada da superfície lingual/palatina de segundo molar a segundo molar com um papel de filtro umedecido em ácido cítrico a 3%. Será feito um "pool' com os papeis de filtro obtidos dos 8 voluntários, para cada grupo. Saliva não estimulada será coletada antes da profilaxia e saliva estimulada, após a coleta da PAE. Após extração das proteínas, as mesmas serão submetidas à cromatografia líquida de fase reversa interligada a um espectrômetro de massas (nLC-ESI-MS/MS). Quantificação proteômica livre de marcadores será feita utilizando o software Protein Lynx Global Service (PLGS). Na etapa in vitro serão confeccionados 75 blocos de esmalte bovino (4 X 4 mm), os quais serão divididos em 5 grupos, sendo um grupo controle negativo, constituído por água deionizada e 4 grupos experimentais: Hb 4 mg/mL, Hb 2 mg/mL, Hb 1mg/mL e Hb 0,1 mg/mL ou CaneCPI-5 0,01 mg/mL (controle positivo). Uma vez ao dia por 3 dias, os espécimes serão expostos às soluções proteicas ou água deionizada, sob agitação por 2 h a 37°C. Os espécimes serão então incubados em pool de saliva humana por 2 h a 37ºC para formação da PAE. Os espécimes serão então lavados em água deionizada e incubados em HCl 0,01 M (pH 2,3) por 10 s a 37ºC, sob agitação. As análises de microdureza de superfície (SHM) serão feitas e as alterações na SMH (SHM baseline - SMH pós-erosão) serão calculadas diariamente. Os dados serão checados quanto à normalidade e homogeneidade, para seleção do teste estatístico apropriado (p<0,05).

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

TATIANA MARTINI; DANIELA RIOS; ALINE DIONIZIO; LUIZA DE PAULA SILVA CASSIANO; CÍNTIA MARIA DE SOUZA E SILVA; EVEN AKEMI TAIRA; TALITA MENDES OLIVEIRA VENTURA; JOÃO VICTOR FRAZÃO CÂMARA; TAMARA TEODORO ARAUJO; ANA CAROLINA MAGALHÃES; et al. Acquired enamel pellicle protects gastroesophageal reflux disease patients against erosive tooth wear. Brazilian Oral Research, v. 37, 2023-09-15. (17/17977-8, 18/12041-7)

MARTINI, TATIANA; RIOS, DANIELA; DIONIZIO, ALINE; SILVA CASSIANO, LUIZA DE PAULA; PEL, VINICIUS TAIOQUI; DE SOUSA E SILVA, CINTIA MARIA; TAIRA, EVEN A.; VENTURA, TALITA MENDES; MAGALHAES, ANA CAROLINA; CARVALHO, THIAGO SAADS; et al. Salivary Hemoglobin Protects against Erosive Tooth Wear in Gastric Reflux Patients. Caries Research, v. 54, n. 5-6, p. 466-474, DEC 2020. (17/17977-8)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MARTINI, Tatiana. Proteoma da película adquirida do esmalte e saliva em pacientes com doença do refluxo gastroesofágico com ou sem desgaste dentário erosivo e avaliação in vitro do potencial protetor da hemoglobina contra a erosão inicial. 2021. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB/SDB) Bauru.