Efeitos de miR-BARTs do vírus de Epstein-Barr nas propriedades in vitro de células derivadas de linfomas humanos e na modulação de vias de sinalização intracelular envolvidas na linfomagênese

• Processo: 17/20352-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Deilson Elgui de Oliveira
• Beneficiário: Brunno Felipe Ramos Caetano
• Instituição Sede: Instituto de Biotecnologia (IBTEC). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 19/03804-0 - Identificação de produtos líticos do vírus de Epstein-Barr (EBV) envolvidos na evasão imune mediada por linfócitos B, BE.EP.DR
• Assunto(s): Cultura de células Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas Proteína 9 associada à CRISPR Transformação celular viral Herpesvirus humano 4
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Carcinogênese Viral | Cas9 | Crispr | cultura celular | Linfomagênese | miR-BARTs | Vírus de Epstein-Barr | Carcinogênese Viral

Resumo

O linfoma de Burkitt (LB) é um linfoma não-Hodgkin de células B altamente agressivo, sendo que praticamente todos os casos de LB endêmico estão associados à infecção pelo vírus de Epstein-Barr (EBV). Formalmente denominado gamaherpesvírus 4 (HHV4), o EBV é um vírus ubíquo, presente em mais de 90% da população humana adulta, e que causa infecção latente por toda a vida do hospedeiro. A infecção por EBV é reconhecida como cancerígena para humanos. Além do LB, o vírus também é detectado nas células neoplásicas de carcinomas de nasofaringe e alguns casos de carcinomas gástricos, além do linfoma de Hodgkin clássico e outros distúrbios linfoproliferativos, principalmente aqueles ocorrendo em pacientes imunocomprometidos. O EBV foi o primeiro vírus em que pequenos RNAs não codificantes (microRNAs ou miRs) foram encontrados codificados no genoma viral. As células B infectadas latentemente expressam abundantemente miRs do EBV localizados no locus BART, denominados miR-BARTs. Nos últimos anos, vários estudos demonstraram que miRs endógenos humanos desempenham um papel regulador crítico na diferenciação e oncogênese das células B; por outro lado, pouco se sabe sobre o papel do EBV miR-BARTs na linfomagênese. Este estudo pretende investigar se a expressão de EBV miR-BARTs afeta parâmetros de saúde e comportamento celular in vitro, bem como vias intracelulares de sinalização relevantes para a linfomagênese. Para tanto, será efetuada edição do genoma de EBV empregando tecnologia CRISPR/CAS9 para suprimir a expressão dos miR-BARTs -7 e -9 virais em linhagens celulares derivadas de linfomas humanos EBV-positivas. Para a deleção dos miR-BARTs -7 ou -9 do EBV, linhagens celulares expressando a endonuclease Cas9 serão produzidas e transduzidas com vetores lentivirais para expressão dos respectivos gRNAs. As linhagens celulares com supressão (knock-out) dos miR-BARTs-7 e -9 do EBV serão então avaliadas quanto às taxas de proliferação celular, viabilidade celular, apoptose, migração e invasão celular in vitro. Por fim, serão também investigadas a expressão de moléculas-chave em vias de sinalização intracelular envolvidas na linfomagênese, tais como NFkB, PI3K / AKT e JAK / STAT.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CAETANO, BRUNNO FELIPE R.; JORGE, BEATRICE ADRIANNE S.; MUELLER-COAN, BARBARA GRASIELE; DE OLIVEIRA, DEILSON ELGUI. Epstein-Barr virus microRNAs in the pathogenesis of human cancers. Cancer Letters, v. 499, p. 14-23, FEB 28 2021. (19/05061-4, 17/20352-0, 17/22312-5, 19/03804-0, 18/12164-1)

CAETANO, BRUNNO F.; MULLER-COAN, BARBARA G.; COAN, RAFAEL L.; FANTINATTI, BRUNO E.; DE OLIVEIRA, DEILSON E.. Identification of potential cellular targets for Epstein-Barr virus encoded microRNAs miR-BART7 and miR-BART9 by in silico analysis. Cancer Research, v. 79, n. 13, p. 2-pg., 2019-07-01. (17/22312-5, 17/23393-9, 17/20352-0)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

CAETANO, Brunno Felipe Ramos. Efeitos de miR-BARTs do vírus de Epstein-Barr na modulação de vias de sinalização intracelular em células derivadas de linfomas humanos. 2022. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Medicina. Botucatu Botucatu.