Análise funcional da xilose isomerase na resposta à xilose por Xanthomonas citri e X. fuscans- tipo B e análise proteômica diferencial desta resposta

• Processo: 17/17470-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2018
• Vigência (Término): 30 de novembro de 2021
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Maria Teresa Marques Novo Mansur
• Beneficiário: Evandro Luis Prieto
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteômica Xilose Xanthomonas citri Cancro (doença de planta) Virulência Western blotting
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cancro cítrico | citri | proteômica diferencial | Xanthomonas citri subsp | Xilose isomerase | Proteomica

Resumo

O Cancro Cítrico é das doenças mais devastadoras para a Citricultura, sendo causado pela bactéria Xanthomonas citri subsp. citri (XAC). As cancroses B e C, formas mais brandas da doença, são causadas pelos tipos B e C de Xanthomonas fuscans ssp. aurantifolii (XauB e XauC, respectivamente), cujo espectro de hospedeiros é muito restrito comparativamente à XAC, a qual infecta todas as espécies de Citrus sp. Análise proteômica entre XAC e XauB realizada anteriormente por nosso grupo detectou muitas proteínas diferencialmente expressas, entre elas, a xilose isomerase, cujas ORFs apresentam contextos genômicos muito diversos nas duas bactérias. O presente trabalho tem como objetivo investigar se há uma resposta metabólica mais eficiente de XAC à xilose que seja determinante da sua maior virulência relativamente à XauB, visto que esse carboidrato é constituinte da parede celular do hospedeiro e pode ser liberado durante a invasão bacteriana. Neste trabalho XAC e XauB serão cultivadas na ausência e presença de xilose, e, com base nas curvas de crescimento resultantes, serão estabelecidas as condições nas quais será realizada a análise proteômica (2D-PAGE/MS-MS) para comparação das proteínas periplasmáticas e extracelulares induzidas por esse carboidrato nas duas bactérias. Também será confirmada a expressão diferencial da xilose isomerase por meio de Western Blot, bem como obtido um mutante de deleção para o gene dessa enzima utilizando metodologia já padronizada em nosso grupo. Resultados preliminares de crescimento de XAC e XauB em xilose já são aqui apresentados e evidenciam que as bactérias possuem respostas distintas. O presente trabalho visa contribuir para o entendimento da patogenicidade de XAC para fins de validação e caracterização de potenciais alvos para o controle do Cancro Cítrico. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ZANDONADI, FLAVIA S.; FERREIRA, SILVIA P.; ALEXANDRINO, ANDRE V.; CARNIELLI, CAROLINA M.; ARTIER, JULIANA; BARCELOS, MARIANA P.; NICOLELA, NICOLE C. S.; PRIETO, EVANDRO L.; GOTO, LEANDRO S.; BELASQUE, JR., JOSE; et al. Periplasm-enriched fractions from Xanthomonas citri subsp. citri type A and X. fuscans subsp. aurantifolii type B present distinct proteomic profiles under in vitro pathogenicity induction. PLoS One, v. 15, n. 12, DEC 18 2020. (13/16082-6, 17/17470-0, 10/04546-0)