Estudos estruturais para a prospecção de agentes contra doenças infecciosas humanas

• Processo: 17/24901-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2018
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Alessandro Silva Nascimento
• Beneficiário: Lívia Oliveira Dantas Clementino
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/26722-8 - Drug discovery contra doenças infecciosas humanos, AP.TEM
• Assunto(s): Biologia estrutural Doenças transmissíveis Fosfato de piridoxal Tiamina pirofosfato Plasmodium falciparum Staphylococcus aureus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: piridoxal fosfato | Plasmodium falciparum | Staphylococcus aureus | Tiamina | Biologia Estrutural

Resumo

No âmbito do projeto temático intitulado "Drug discovery against human infectious diseases", as enzimas que compõem as vias de biossíntese de piridoxal fosfato (PLP, vitamina B6) e tiamina pirofosfato (TPP, vitamina B1) para alguns microrganismos patogênicos serão estudadas. Mais especificamente, as enzimas destas vias serão avaliadas para Staphylococcus aureus e Plasmodium falciparum em busca de alvos candidatos para a prospecção de novos agentes para o tratamento de infecções em humanos. Neste projeto de doutorado direto realizaremos estudos estruturais envolvendo a clonagem, a expressão, a cristalização e a determinação estrutural das enzimas da via de biossíntese da vitamina B6 em P. falciparum. Para esta finalidade, genes sintéticos já estão sendo adquiridos com as sequências codificantes para as enzimas da via otimizadas para a expressão em E. coli. Estes genes serão amplificados e clonados em vetor de expressão pET-TRx1A empregando o sistema LIC para a expressão heteróloga das enzimas. Em seguida, os genes serão expressos e os produtos serão purificados para cristalização. Esta etapa será realizada através de ensaios robotizados. Os cristais, se e quando obtidos, serão utilizados para coletas de dados de difração em fonte doméstica ou no LNLS. Adicionalmente, em havendo tempo hábil neste projeto, outros alvos moleculares promissores em S. aureus e outros microrganismos patogênicos poderão ser explorados, visando a identificação de compostos com potencial inibidor baseada nas estruturas cristalográficas em etapas posteriores. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MORAO, LUANA G.; MANZINE, LIVIA R.; CLEMENTINO, LIVIA OLIVEIRA D.; WRENGER, CARSTEN; NASCIMENTO, ALESSANDRO S.. A scalable screening of E. coli strains for recombinant protein expression. PLoS One, v. 17, n. 7, p. 10-pg., 2022-07-25. (17/24901-8, 17/03966-4, 15/26722-8, 19/20219-3, 20/03983-9)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

CLEMENTINO, Lívia Oliveira Dantas. Enterococcus faecalis: Cluster epa. 2023. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Física de São Carlos (IFSC/BT) São Carlos.