Busca avançada
Ano de início
Entree

Estudos estruturais para a prospecção de agentes contra doenças infecciosas humanas

Processo: 17/24901-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2018
Vigência (Término): 31 de janeiro de 2022
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
Pesquisador responsável:Alessandro Silva Nascimento
Beneficiário:Lívia Oliveira Dantas Clementino
Instituição-sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:15/26722-8 - Drug discovery contra doenças infecciosas humanos, AP.TEM
Assunto(s):Biologia estrutural   Doenças transmissíveis   Fosfato de piridoxal   Tiamina pirofosfato   Plasmodium falciparum   Staphylococcus aureus

Resumo

No âmbito do projeto temático intitulado "Drug discovery against human infectious diseases", as enzimas que compõem as vias de biossíntese de piridoxal fosfato (PLP, vitamina B6) e tiamina pirofosfato (TPP, vitamina B1) para alguns microrganismos patogênicos serão estudadas. Mais especificamente, as enzimas destas vias serão avaliadas para Staphylococcus aureus e Plasmodium falciparum em busca de alvos candidatos para a prospecção de novos agentes para o tratamento de infecções em humanos. Neste projeto de doutorado direto realizaremos estudos estruturais envolvendo a clonagem, a expressão, a cristalização e a determinação estrutural das enzimas da via de biossíntese da vitamina B6 em P. falciparum. Para esta finalidade, genes sintéticos já estão sendo adquiridos com as sequências codificantes para as enzimas da via otimizadas para a expressão em E. coli. Estes genes serão amplificados e clonados em vetor de expressão pET-TRx1A empregando o sistema LIC para a expressão heteróloga das enzimas. Em seguida, os genes serão expressos e os produtos serão purificados para cristalização. Esta etapa será realizada através de ensaios robotizados. Os cristais, se e quando obtidos, serão utilizados para coletas de dados de difração em fonte doméstica ou no LNLS. Adicionalmente, em havendo tempo hábil neste projeto, outros alvos moleculares promissores em S. aureus e outros microrganismos patogênicos poderão ser explorados, visando a identificação de compostos com potencial inibidor baseada nas estruturas cristalográficas em etapas posteriores. (AU)