Identificação em larga escala de genes que medeiam a quiescência celular induzida pela laminina

• Processo: 17/25437-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de março de 2018
• Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2022
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Alexandre Bruni Cardoso
• Beneficiário: Mayara Carolinne Silva Botelho
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/10492-0 - Hippo-YAP como uma via de convergência dos sinais bioquímicos e mecânicos provenientes da matriz extracelular durante a morfogênese da glândula mamária e a progressão do câncer de mama, AP.JP
• Assunto(s): Matriz extracelular Laminina Ciclo celular CRISPR-Cas9 Transformação celular neoplásica Sequenciamento de nova geração Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cas9 | ciclo celular | Crispr | laminina | matriz extracelular | Quiescência | tumorigenese | sinalização da matriz extracelular

Resumo

A proliferação é o atributo mais conservado e fundamental de um sistema vivo. É a propagação de material genético através da divisão celular, mais do que quaisquer outros fatores, que distingue a vida de sistemas naturais inanimados. Entretanto, a maioria das células do nosso corpo não estão se dividindo, mas encontram-se num estado de quiescência. Por que, então, a quiescência triunfou durante a evolução e como ela é controlada? Sabemos que as células de organismos complexos param de proliferar mesmo na presença de uma abundância de recursos. É mais provável que fatores autônomos que estão presentes no microambiente celular desencadeiem e sustentem a quiescência celular. Ademais, a perda da quiescência é uma das características principais do Câncer. Para buscar elucidar os mecanismos moleculares que permeiam o processo de aquisição e manutenção, nós propomos usar identificação de genes em larga escala em células expostas aos sinais de quiescência da matriz extracelular (MEC). Células de uma linhagem epitelial da glândula mamária de camundongo fêmea serão transfectadas com sondas fluorescentes para o ciclo celular e com uma biblioteca de CRISPR/CAS9 e cultivadas numa matriz rica em laminina-111, uma proteína da MEC que induz quiescência. Aquelas células que continuam proliferando serão isoladas por cell sorting e submetidas a sequenciamento (next generation sequencing) para identificação do conjunto de genes nocauteados. Serão escolhidos de 3 a 5 alvos que serão validados por silenciamento e superexpressão seguidos de análise fenotípica em culturas tridimensionais. Com a conclusão deste projeto, a expectativa é obter informações cruciais sobre os mecanismos moleculares que controlam a quiescência em células normais e como esta regulação é perdida no Câncer. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CERQUEIRA, OTTO LUIZ DUTRA; BOTELHO, MAYARA CAROLLINE SILVA; FIORE, ANA PAULA ZEN PETISCO; OSORIO, CYNTHIA APARECIDA BUENO DE TOLEDO; TOMASIN, REBEKA; MORAIS, MAURO CESAR CAFUNDO; LOPEZ, ROSSANA VERONICA MENDOZA; CARDOSO, ELAINE CRISTINA; VILELLA-ARIAS, SANTIAGO ANDRES; REIS, EDUARDO MORAES; et al. Prognostic value of integrin alpha V expression and localization pattern in invasive breast carcinomas. NEOPLASIA, v. 30, p. 13-pg., 2022-08-01. (14/10492-0, 17/25437-3, 14/25832-1, 19/26767-2)

ZEN PETISCO FIORE, ANA PAULA; RODRIGUES, ANA MARIA; RIBEIRO-FILHO, HELDER VERAS; MANUCCI, ANTONIO CARLOS; DE FREITAS RIBEIRO, PEDRO; SILVA BOTELHO, MAYARA CAROLINNE; VOGEL, CHRISTINE; LOPES-DE-OLIVEIRA, PAULO SERGIO; PAGANO, MICHELE; BRUNI-CARDOSO, ALEXANDRE. Extracellular matrix stiffness regulates degradation of MST2 via SCF beta TrCP. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-GENERAL SUBJECTS, v. 1866, n. 12, p. 11-pg., 2022-09-01. (17/25437-3, 17/18641-3, 18/00629-0, 14/25832-1, 14/10492-0, 17/18067-5, 19/26767-2)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

BOTELHO, Mayara Carolinne Silva. Identificação em larga escala de genes que medeiam a quiescência celular e a diferenciação para lactogênese induzidas pela laminina. 2022. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.