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Efeito da superfície de titânio com nanotopografia sobre a expressão temporal de Rad GTPase em células osteoblásticas

Processo: 17/26574-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de março de 2018
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2018
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Cirurgia Buco-maxilo-facial
Pesquisador responsável:Márcio Mateus Beloti
Beneficiário:Letícia Faustino Adolpho
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Implantodontia   Nanotopografia   Titânio   Osteoblastos   Expressão de proteínas

Resumo

Superfícies de titânio (Ti) com nanotopografia podem favorecer a diferenciação osteoblástica por modularem a síntese de fatores locais que atuam sobre diferentes vias de sinalização que regulam a formação óssea. Resultados do nosso grupo de pesquisa evidenciaram que o potencial osteogênico da nanotopografia, obtida por condicionamento com solução de H2SO4/H2O2, envolve a modulação de, ao menos, dois mecanismos intracelulares regulados por BMPs e Integrinas. Estudos recentes identificaram a expressão e a participação de uma proteína denominada Rad GTPase (Rad, do Inglês, Ras-related associated with diabetes) no processo de diferenciação osteoblástica e na modulação da homeostasia óssea. Considerando a relevância da Rad para a osteogênese nossa hipótese é que o potencial osteogênico da superfície de Ti com nanotopografia se deve, ao menos em parte, à sua capacidade de modular a expressão de Rad. Assim, o objetivo desse estudo é avaliar o efeito da superfície de Ti com nanotopografia, comparada à superfície de Ti usinada, sobre a expressão temporal de Rad em células osteoblásticas. Para testar nossa hipótese, células da linhagem MC3T3-E1, subclone 14, serão cultivadas sobre discos de Ti com nanotopografia (Ti-Nano) e discos de Ti usinado (Ti-Controle) e as repostas celulares serão avaliadas por até 14 dias. Aos 3, 5, 7, 10 e 14 dias, será avaliada a expressão dos genes marcadores ósseos, fosfatase alcalina (ALP), RUNX2, osterix, osteocalcina e osteopontina e os genes Rad e Matrix Gla Protein (MGP) por PCR em tempo real. Aos 10 dias, a atividade in situ de ALP será também avaliada qualitativamente pelo método Fast Red. Os dados quantitativos serão submetidos ao teste de Kolgomorov-Smirnov para avaliar a aderência à curva normal e posteriormente analisados por testes paramétricos ou não paramétricos para verificar as diferenças entre as amostras estudadas. O nível de significância será de 5% (pd0,05). (AU)