Localização mitocondrial de componentes do complexo MRN em células de mamíferos

• Processo: 18/04471-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de abril de 2018
• Vigência (Término): 31 de março de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Nadja Cristhina de Souza Pinto
• Beneficiário: Laís Yoshie Morikawa Muta
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/04372-0 - DNA mitocondrial: mecanismos de manutenção de sua estabilidade e impacto em doenças, AP.TEM
• Assunto(s): DNA mitocondrial Reparo do DNA Mecanismos moleculares Mitocôndrias Imunofluorescência Western blotting
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: complexo MRN | mitocôndria | Nbs1 | Quebra de dupla fita | reparo de DNA | Reparo de DNA

Resumo

Embora o mecanismo molecular que causa a formação e acúmulo de deleções no mtDNA não seja conhecido, foi proposto que deleções somáticas resultam de eventos de reparo incompletos ou não resolvidos, principalmente de reparo de que quebra de fita dupla. Deleções no mtDNA estão relacionadas a doenças mitocondriais como a síndrome de Kearns-Sayre, e a doenças complexas como neurodegeneração e câncer. Os mecanismos moleculares de reparo de quebra de dupla fita e de acúmulo de lesões no mtDNA não estão claramente esclarecidos como os que ocorrem no DNA nuclear. Sabe-se que no núcleo as quebras de fitas dupla são reparadas por duas vias: a via de recombinação de ligação de pontas não homólogas; e a via de recombinação homóloga (HR). A via HR necessita de um complexo proteico para sua atuação, o complexo MRN, formado pelas subunidades Mre11, Rad50 e Nbs1. Recentemente foi demonstrada a presença da subunidade Mre11 em mitocôndrias de rim murino, levantando a possibilidade da atuação do complexo MRN de forma análoga ou semelhante à feita no núcleo. Para investigar tal possibilidade, será verificada (I) a presença do componente Nbs1 em mitocôndrias de linhagens humanas HEK293T e HeLa por ensaios de imunofluorescência e western blot, e (II) se a expressão e a localização mitocondrial de Nsb1 é alterada pelo tratamento com o peróxido de hidrogênio, um agente que causa quebras de fita dupla no DNA.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

FREIRE, T. S.; MORI, M. P.; MIRANDA, J. N. F. A.; MUTA, L. Y. M.; MACHADO, F. T.; MORENO, N. C.; SOUZA-PINTO, N. C.. Increased H2O2 levels and p53 stabilization lead to mitochondrial dysfunction in XPC-deficient cells. Carcinogenesis, v. 42, n. 11, p. 1380-1389, NOV 2021. (17/04372-0, 18/04471-1, 10/51906-1, 18/26555-2, 19/00480-9, 16/15407-7)