Detecção de células tumorais circulantes por isolamento baseado em tamanho (ISET) e RT-qPCR em cães portadores de Melanoma

• Processo: 17/22374-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de maio de 2018
• Vigência (Término): 31 de outubro de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal
• Pesquisador responsável: Cristina de Oliveira Massoco Salles Gomes
• Beneficiário: Victor Nowosh
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Diagnóstico clínico Oncologia veterinária Melanoma animal Células neoplásicas circulantes Biópsia líquida Monofenol mono-oxigenase Cães
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biópsia líquida | Mart-1 | Melan-A | Pnl2 | Tirosinase | Diagnóstico em Oncologia

Resumo

Melanoma é uma neoplasia maligna com alto potencial metastático em cães. Uma das estratégias para compreender os mecanismos de metástase é a biopsia líquida, que consiste na detecção de Células Tumorais Circulantes (CTCs) e outros produtos tumorais na circulação, permitindo avaliação da biologia do tumor, de prognóstico e de resposta ao tratamento em tempo real de forma não-invasiva. A metodologia de isolamento baseado em tamanho (ISET) permite a detecção e quantificação de CTCs íntegras. Já, a aplicação de PCR transcriptase-reversa em Real Time (RT-qPCR) tem como alvo transcritos de RNA mensageiro associados ao tumor. Apesar de seu amplo uso em pacientes humanos, a detecção de CTCs íntegras ainda não foi aplicada em cães, e estudos com RT-qPCR já foram aplicados em Melanoma canino, mas não para a detecção de CTCs. O objetivo principal deste estudo é desenvolver e validar protocolos de ISET e de RT-qPCR para detecção de CTCs em cães com melanoma oral e de dígito. Estudo in vitro para validação e avaliação da sensibilidade do ensaio será conduzido com amostras de sangue de cães saudáveis adicionadas quantidades conhecidas de células tumorais de linhagem primária de melanoma oral canino. Serão avaliadas múltiplas amostras de 30 pacientes caninos com melanoma oral ou de dígito. A hipótese desse projeto é de que os resultados da biópsia líquida apresentarão correlação prognóstica com a sobrevida dos pacientes com melanoma, de forma similar ao observado em pacientes humanos. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

NOWOSH, Victor. Detecção de células tumorais circulantes (CTCs) por isolamento baseado em tamanho e reação em cadeia da polimerase via transcriptase- reversa em tempo real (RT-qPCR) em cães com melanoma oral. 2022. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ/SBD) São Paulo.