Papel do MicroRNA-9 no controle da expressão de Nox4 e na migração de células de melanoma

• Processo: 17/24439-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2018
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: Lucia Rossetti Lopes
• Beneficiário: Marcella Liciani Franco
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/07937-8 - Redoxoma, AP.CEPID
• Assunto(s): Oncologia Melanoma NADPH oxidase Espécies de oxigênio reativas Alvo terapêutico MicroRNAs Movimento celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Melanoma | miR-9 | Nox4 | Oncologia

Resumo

A NADPH oxidase 4 (Nox4) é uma isoforma de NADPH oxidase. Esta família de enzimas é dedicada à produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) nas células. Sabe-se que a expressão e atividade aumentadas de Nox4 ocorrem em células de melanoma e podem influenciar na proliferação, migração e sobrevivência destas. O melanoma é o tipo de câncer de pele mais agressivo existente, principalmente, devido a sua capacidade de originar metástases. Diante disso, elucidar vias celulares que regulem a expressão de Nox4 no melanoma é significativo, por exemplo, para a descoberta de novos alvos terapêuticos para este tumor. Estudos sugerem que uma das possíveis vias de regulação desta enzima é pelo miR-9, um microRNA com expressão alterada no melanoma. O objetivo deste projeto, portanto, é analisar se o miR-9 modifica a migração de células de melanoma através da regulação da expressão de Nox4. Para tanto, serão utilizadas técnicas como cultura de melanócitos (linhagem NGM) e de células de melanoma (linhagens A-375, SK-Mel 19, SK-Mel 28, SK-Mel 147), além da extração de RNA total destas células e RT-qPCR para Nox4 e miR-9. Também serão realizados ensaios de Western blot para quantificação da expressão de proteína Nox4 nestas linhagens celulares e transfecção destas com um mímico de miR-9 para que haja sua superexpressão celular. Após a transfecção, será realizada nova quantificação da expressão de Nox4, junto da realização de ensaios de migração celular.