Influência do laser de baixa intensidade nos neurônios: um estudo eletrofisiológico para ajudar a compreender os efeitos analgésicos do infravermelho na neuropatia diabética

• Processo: 18/05108-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2018
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2019
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Fisioterapia e Terapia Ocupacional
• Pesquisador responsável: Carlos Amilcar Parada
• Beneficiário: Willians Fernando Vieira
• Supervisor: Rodney Philip Oconnor
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: École des Mines de Saint-Étienne, Gardanne (MINES Saint-Étienne), França
• Vinculado à bolsa: 15/12673-5 - Efeitos da terapia laser de baixa intensidade (LLLT) em modelo de neuropatia diabética experimental, BP.DR
• Assunto(s): Neuropatias diabéticas Eletrofisiologia Terapia a laser de baixa intensidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: diabetic neuropathy | dorsal root ganglia | electrophysiology | Lllt | photobiomodulation | Eletrofototermoterapia

Resumo

Aproximadamente 50% dos pacientes diabéticos desenvolvem neuropatia periférica com complicações irreversíveis no sistema nervoso periférico. A hiperglicemia é a principal causa do estresse oxidativo e promove um ambiente que pode danificar os nervos periféricos e vias de sinalização ligadas à ele. Os nociceptores podem ser afetados seletivamente pela terapia laser de baixa intensidade (LLLT), uma vez que já foi proposto que este efeito sustente a analgesia promovida pela LLLT no tratamento da dor aguda e crônica. Em estudos de cultura de células usando GRD de rato, os comprimentos de onda de 830, 808 e 650 nm levaram às alterações neurofisiológicas reversíveis do potencial de membrana mitocondrial (MMP). No entanto, nenhum estudo mostrou o efeito direto da irradiação por laser infravermelho em neurônios sensibilizados, em uma condição de estresse oxidativo e hiperglicemia, que imita uma situação de neuropatia diabética. Assim, o objetivo geral deste estudo é compreender a influência direta da LLLT na atividade elétrica de neurônios HT22 do hipocampo de camundongo e GRD de rato. Em primeiro lugar, usaremos culturas de células imortalizadas de neurônios do hipocampo de camundongo HT22 e após os primeiros testes, coletaremos os GRD de ratos machos LEW/HsdUnib (Lewis) isogênicos (4 semanas de idade). Os neurônios HT22 e os neurônios de GRD serão expostos à irradiação com laser infravermelho AsGa (904 nm), usando um dispositivo laser Endophoton LLT-1307 (KLD Biosystems® - Brasil), classe IIIB; frequência contínua; energia 2,03 joule; 29 segundos; 70 mW de potência; feixe de saída de 0,001 cm²; irradiância de 7.000 mW/cm². Durante a irradiação com o laser, os neurônios serão submetidos a registros eletrofisiológicos do potencial de membrana. Os neurônios serão transferidos para uma câmara de gravação através da qual fluído cerebrospinal artificial oxigenado (ACSF) será constantemente perfundido (2 mL/min) à temperatura ambiente. Também investigaremos o MMP usando éster metílico de tetrametil rodamina (TMRM - Invitrogen/Molecular Probes). Os neurônios HT22 e DRG, expostos à LLLT, serão corados pela solução Hoechst Stain (Sigma-Aldrich). As células também serão tratadas com FluoVolt em solução fisiológica suplementada com o corante e com o PowerLoad Concentrate. O PowerLoad Concentrate (um componente do FluoVolt Kit) é uma formulação otimizada de polióis tensoativos plurônicos, que ajudam a solubilizar o corante. Estes experimentos ajudarão a compreender os possíveis efeitos da LLLT na atividade elétrica dos neurônios, uma vez que acreditamos em um "efeito hiperpolarizante" promovido pela irradiação com laser infravermelho. Este efeito pode estar relacionado à analgesia promovida pela LLLT na dor neuropática diabética. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

VIEIRA, WILLIANS F.; DE MAGALHAES, SILVIANE F.; FARIAS, FELIPE H.; DE THOMAZ, ANDRE A.; PARADA, CARLOS A.. Raman spectroscopy of dorsal root ganglia from streptozotocin-induced diabetic neuropathic rats submitted to photobiomodulation therapy. Journal of Biophotonics, v. 12, n. 11, JULY 2019. (15/12673-5, 14/25153-7, 18/05108-8)

VIEIRA, WILLIANS FERNANDO; MALANGE, KAUE FRANCO; DE MAGALHAES, SILVIANE FERNANDES; PAES LEMES, JULIA BORGES; DOS SANTOS, GILSON GONCALVES; NISHIJIMA, CATARINE MASSUCATO; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE; DA CRUZ-HOFLING, MARIA ALICE; PARADA, CARLOS AMILCAR; TAMBELI, CLAUDIA HERRERA. Anti-hyperalgesic effects of photobiomodulation therapy (904 nm) on streptozotocin-induced diabetic neuropathy imply MAPK pathway and calcium dynamics modulation. SCIENTIFIC REPORTS, v. 12, n. 1, p. 18-pg., 2022-10-06. (18/05108-8, 15/12673-5, 14/25153-7)

VIEIRA, WILLIANS FERNANDO; MALANGE, KAUE FRANCO; DE MAGALHAES, SILVIANE FERNANDES; DOS SANTOS, GILSON GONCALVES; RODRIGUES DE OLIVEIRA, ALEXANDRE LEITE; CRUZ-HOFLING, MARIA ALICE; PARADA, CARLOS AMILCAR. Gait analysis correlates mechanical hyperalgesia in a model of streptozotocin-induced diabetic neuropathy: A CatWalk dynamic motor function study. Neuroscience Letters, v. 736, p. 12-pg., 2020-09-25. (15/12673-5, 14/25153-7, 18/05108-8)