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Estudo da adsorção e dessorção de lisina em filmes automontados layer-by-layer por meio de sistema FRET

Processo: 18/11429-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de setembro de 2018
Vigência (Término): 31 de março de 2019
Área do conhecimento:Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Orgânica
Pesquisador responsável:Luiz Henrique Catalani
Beneficiário:Raphael Colonese Vlasman
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:11/21442-6 - Polímeros sintéticos e naturais aplicados à engenharia de tecido, AP.TEM
Assunto(s):Polímeros   Biomateriais

Resumo

Este projeto objetiva o estudo do processo de adsorção e dessorção da lisozima (LYS) em filmes multicamadas formados por automontagem Layer-by-layer (LbL) de heparina (HEP; monocamada negativa) e quitosana (CHI; monocamada positiva) sobre suporte de silício e suportes poliméricos de PLLA. O estudo de adsorção será baseado na funcionalização dos componentes do sistema LbL com sondas do sistema Fluorescence Ressonance Energy Transfer (FRET); do qual a LYS será funcionalizada com isotiocianato de fluoresceína (FITC), enquanto, a HEP será funcionalizada com cloreto de dansila. Após o desenvolvimento do procedimento eficiente de funcionalização da LYS e HEP, serão produzidas multicamadas de LbL tanto nos suportes poliméricos como no suporte de silício para um acompanhamento da cinética e mecanismo de adsorção das multicamadas em função da mudança de fluorescência. Em seguida, diferentes configurações das multicamadas serão testadas para o estudo da migração da proteína entre os diferentes pares de camadas de polieletrólitos. Nesta etapa, diferentes conformações de monocamadas de HEP funcionalizadas e de LYS serão testadas variando sua altura nos filmes. Por último, será feito o estudo de liberação da LYS variando a sua posição nas multicamadas (camadas iniciais, intermediárias e finais), e assim, desenvolver um controle sobre a cinética de liberação. O objetivo principal é a verificação da formação de coacervados entre as proteínas e os polieletrólitos e como este evento pode influenciar no mecanismo de adsorção e dessorção das proteínas do sistema LbL.

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