Estudo da adsorção e dessorção de lisina em filmes automontados layer-by-layer por meio de sistema FRET

• Processo: 18/11429-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Orgânica
• Pesquisador responsável: Luiz Henrique Catalani
• Beneficiário: Raphael Colonese Vlasman
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 11/21442-6 - Polímeros sintéticos e naturais aplicados à engenharia de tecido, AP.TEM
• Assunto(s): Biomateriais Polímeros Muramidase Polieletrólitos Adsorção (química)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biomateriais | coacervados | Layer-by-Layer | Liberação de proteínas controlada | Polímeros | Sistema FRET | polímeros e colóides

Resumo

Este projeto objetiva o estudo do processo de adsorção e dessorção da lisozima (LYS) em filmes multicamadas formados por automontagem Layer-by-layer (LbL) de heparina (HEP; monocamada negativa) e quitosana (CHI; monocamada positiva) sobre suporte de silício e suportes poliméricos de PLLA. O estudo de adsorção será baseado na funcionalização dos componentes do sistema LbL com sondas do sistema Fluorescence Ressonance Energy Transfer (FRET); do qual a LYS será funcionalizada com isotiocianato de fluoresceína (FITC), enquanto, a HEP será funcionalizada com cloreto de dansila. Após o desenvolvimento do procedimento eficiente de funcionalização da LYS e HEP, serão produzidas multicamadas de LbL tanto nos suportes poliméricos como no suporte de silício para um acompanhamento da cinética e mecanismo de adsorção das multicamadas em função da mudança de fluorescência. Em seguida, diferentes configurações das multicamadas serão testadas para o estudo da migração da proteína entre os diferentes pares de camadas de polieletrólitos. Nesta etapa, diferentes conformações de monocamadas de HEP funcionalizadas e de LYS serão testadas variando sua altura nos filmes. Por último, será feito o estudo de liberação da LYS variando a sua posição nas multicamadas (camadas iniciais, intermediárias e finais), e assim, desenvolver um controle sobre a cinética de liberação. O objetivo principal é a verificação da formação de coacervados entre as proteínas e os polieletrólitos e como este evento pode influenciar no mecanismo de adsorção e dessorção das proteínas do sistema LbL.