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Expressão em Pichia Pastoris da Ts5, uma neurotoxina da peçonha de Tityus serrulatus, com ação em canais para sódio

Processo: 18/09876-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de setembro de 2018
Vigência (Término): 31 de agosto de 2019
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Farmácia - Análise Toxicológica
Pesquisador responsável:Eliane Candiani Arantes Braga
Beneficiário:Laura Martins Miranda Fernandes
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Neurotoxinas   Tityus serrulatus   Pichia pastoris   Expressão heteróloga

Resumo

No Brasil, a espécie de escorpião Tityus serrulatus tem sido amplamente estudada, visto que é responsável por envenenamentos graves no país, com alta taxa de letalidade. A peçonha desta espécie apresenta uma toxicidade muito alta e é fonte de uma diversidade de moléculas com potencial aplicação biotecnológica e farmacêutica, sendo as neurotoxinas os compostos mais importantes, devido à sua capacidade de interferir nos mecanismos de permeabilidade iónica em células de membrana excitáveis e interagir especificamente com canais de sódio e potássio dependentes de voltagem. Deste modo, o estudo das neurotoxinas presentes nesta peçonha tem apresentado um grande potencial para a indústria farmacêutica, buscando desenvolver novos fármacos, como por exemplo o caso do Captopril. Os objetivos deste trabalho são padronizar a expressão heteróloga da toxina Ts5, em Pichia pastoris, e realizar a avaliação da integridade da toxina recombinante, utilizando técnicas de expressão heteróloga de proteínas, purificação a partir de técnicas de cromatografia (fast protein liquid chromatography - FPLC), eletroforese em gel e espectrometria de massas por MALDI-TOF. Posteriormente os resultados serão analisados a fim de avaliar se a expressão heteróloga da proteína foi eficaz, e se a Ts5 recombinante mantém a integridade da atividade fisiológica da Ts5 nativa. Este estudo representa importância ímpar no avanço da produção de antivenenos mais eficientes e também no estudo de novas fontes de medicamentos. Deste modo, este projeto mostra ser de grande relevância para a comunidade acadêmica, visando esclarecer a ação desta toxina no sistema imune humano e a possível produção de novos fármacos e antivenenos.

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