Expressão e purificação de enzimas xilanolíticas recombinantes e estudo de suas atividades contra arabinoxilanos de trigo e cana-de-açúcar

• Processo: 18/04504-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2018
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Acordo de Cooperação: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
• Pesquisador responsável: Richard John Ward
• Beneficiário: Carolina Victal Garbelotti
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Hidrólise enzimática Glucuronidase Endo-1,4-beta-xilanases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Acetil Xilano Esterase | Arabinofuranosidase | Arabinoxilano | Feruloil Esterase | Glucuronidase | Hidrolise enzimática | Sinergia | Xilanase | Bioquímica

Resumo

A procura por métodos de aproveitamento da biomassa lignocelulósica para produção de etanol de segunda geração tem incentivado a pesquisa por enzimas que possam degradar esta matéria prima e disponibilizar açúcares fermentáveis. Entretanto, a composição variada e recalcitrante da biomassa lignocelulósica exige um conjunto de enzimas agindo sinergicamente para sua completa hidrólise. Assim, este projeto tem como objetivo a expressão, purificação e avaliação da atividade das enzimas Ferulouil Esterase (Fae), Acetil Xilano Esterase (Axe), Arabinofuranosidase (Ara), Xilanase (Xil) e ±-Glucuronidase (AGlu), que têm como substrato diferentes ligações glicosídicas do polissacarídeo arabinoxilano presentes nesta matéria prima complexa. Plasmídeos pET-28 com insertos das enzimas serão transformados em cepas de Escherichia coli. As enzimas serão purificadas por cromatografia de afinidade e utilizadas na verificação de suas atividades, sozinhas e em sinergia, contra arabinoxilano de trigo e cana-de-açúcar, visando avaliar a possibilidade de elaboração de misturas para compor coquetéis enzimáticos eficientes para hidrólise da biomassa em que as enzimas trabalhem sinergicamente.