Exposição materna a diferentes ftalatos combinados: efeitos transgeracionais relacionados ao desenvolvimento da próstata

• Processo: 18/09510-5
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de outubro de 2018
• Vigência (Término): 30 de setembro de 2019
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
• Pesquisador responsável: Luis Antonio Justulin Junior
• Beneficiário: Luiz Guilherme Alonso Costa
• Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Reprodução Toxicologia Desenvolvimento fetal Danos por fatores ambientais Próstata Ftalatos Western blotting Imuno-histoquímica

Resumo

O interesse por fatores ambientais que interfiram no desenvolvimento intrauterino e promovam alterações morfofuncionais, transitórias ou permanentes, incluindo as que podem ser transmitidas aos descendentes, configuram uma área de extremo interesse científico chamada DOHaD (Developmental Origns of Health and Disease). Os ftalatos representam um grupo de substâncias utilizadas na indústria e são encontrados em diferentes concentrações na urina e no plasma de seres humanos. Assim, o objetivo desse estudo será o de investigar se a exposição gestacional e lactacional a diferentes concentrações de uma mistura de ftalatos é capaz de alterar a estrutura da próstata de ratos da geração F1 e F2, bem como de marcadores moleculares teciduais capazes de demonstrar alterações no desenvolvimento e fisiologia da glândula. Para alcançar esse objetivo, ratas prenhes da linhagem Sprague-Dawley serão aleatoriamente divididas em 4 grupos experimentais: (controle (veículo); 20 µg/kg/dia, 200 µg/kg/dia, 200 mg/kg/dia) e receberão as respectivas doses da mistura por gavagem na seguinte proporção: 19% DEHP (Bis(2-ethylhexyl) phthalate), 36% DEP (Diethylphthalate), 15% DBP (Di-n-butilphthalate), 10% DiBP (DiisobutylPhthalate), 8% BBzP (Butylbenzylphthalate), and 10% DiNP (Diisononylphthalate); e serão expostas do dia gestacional 10 (DG10) ao dia pós-natal 21 (DPN21). Os machos da geração F1 serão eutanasiados no DPN22 e DPN120. Alguns machos da geração F1 serão acasalados com fêmeas não expostas e os seus descendentes (F2) serão eutanasiados no DPN22. Os dados gestacionais, bem como a distância anogenital e a descida testicular serão avaliados. A próstata ventral dos animais será pesada, e um hemilobo será fixado em Methacarn e destinado para as análises histológicas e imunohistoquímicas (IHQ), enquanto que o outro hemilobo será congelado em nitrogênio líquido para extração de proteínas e Western Blot. Serão avaliados os seguintes marcadores teciduais por IHQ: AR (receptor de andrógeno), Ki67 (proliferação celular); alfa-actina (músculo liso) e E-caderina (junções epiteliais); e por WB: SIRT1 (marcador de estresse oxidativo) e Prostateína (marcador da atividade funcional). Este projeto faz parte de um estudo mais amplo com enfoque molecular epigenético que encontra-se em desenvolvimento sob a coordenação do Prof. Adj. Wellerson Rodrigo Scarano (co-orientador), com colaborações internacionais e financiamento da FAPESP.