| Processo: | 18/13027-8 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Iniciação Científica |
| Data de Início da vigência: | 01 de outubro de 2018 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2021 |
| Área de conhecimento: | Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Orgânica |
| Pesquisador responsável: | Taicia Pacheco Fill |
| Beneficiário: | Daniel Yuri Akiyama |
| Instituição Sede: | Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Biologia molecular Produtos naturais Biossíntese de proteínas Metabólitos secundários Perfil metabólico Penicillium Plasmodium brasilianum Saccharomyces cerevisiae Técnicas de diagnóstico molecular |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Deleção genética | histona deacetilase | metabólitos secundários | Penicillium brasilianum | Produtos Naturais | Biologia Molecular |
Resumo O fungo Penicillium brasilianum, isolado como endofítico de Melia azedarach, apresenta um grande potencial de produção de metabólitos secundários bioativos conforme verificado em análises funcionais do genoma deste microorganismo. O fungo Penicillium brasilianum teve seu genoma recentemente sequenciado e o assembly final revelou 252 supercontigs os quais foram submetidos a predições gênicas e anotação automática. As análises funcionais do genoma revelaram 69 possíveis clusteres biossintéticos, sendo 11 relacionados a biossíntese de potenciais compostos policetídicos via enzimas do tipo PKS (policetídeos sintase); 12 diferentes clusteres envolvidos na produção de metabólitos secundários formados via enzimas do tipo NRPS (peptídeo não-ribossomal sintetases) e 6 clusteres biossintéticos híbridos, entre eles o híbrido NRPS-terpeno responsável pela biossíntese de alcalóides, indicando o grande potencial deste organismo em produzir metabólitos secundários bioativos. Os genes que codificam a produção destes metabólitos encontram-se em clusteres, ou seja, agrupamentos de genes biossintéticos que participam de uma mesma via metabólica. Entretanto, a partir de condições padrão de cultivo em laboratório, muitas vezes não conseguimos acesso a estes produtos naturais, sendo que a maioria destes clusteres biossintéticos encontram-se silenciados. Uma das abordagens utilizadas para promover a ativação destes clusteres gênicos é a alteração da configuração da cromatina, uma vez que ela é um importante regulador da expressão gênica em eucariotos. A deleção do gene HdaA, responsável pela codificação das enzimas histona deacetilase, aumenta a disponibilidade da fita de DNA para a transcrição, podendo ativar clusteres gênicos previamente silenciados. Neste projeto, objetivamos a deleção do gene HdaA do fungo P. brasilianum, como uma estratégia para ativação da produção de metabólitos secundários e desta forma, promover diversidade de produtos naturais. A deleção será conduzida a partir da construção de um cassete de deleção para o gene HdaA utilizando sistema de recombinação homóloga in vivo em S. cerevisiae. O material será purificado e usado nas reações de transformação da linhagem selvagem para a produção dos mutantes. Após a confirmação do mutante obtido a partir de técnicas moleculares, será realizada a comparação do perfil metabólico do fungo selvagem e do mutante por técnicas de LC-MS-MS e posteriormente caracterização de possíveis metabólitos induzidos por RMN 1D e 2D. | |
| Matéria(s) publicada(s) na Agência FAPESP sobre a bolsa: | |
| Mais itensMenos itens | |
| TITULO | |
| Matéria(s) publicada(s) em Outras Mídias ( ): | |
| Mais itensMenos itens | |
| VEICULO: TITULO (DATA) | |
| VEICULO: TITULO (DATA) | |