Geração de células endoteliais humanas derivadas de linhagens de hiPSC com mutações em FBN1

• Processo: 18/14897-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2018
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2019
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Lygia da Veiga Pereira
• Beneficiário: Bianca Portela Costa
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/08135-2 - CTC - Centro de Terapia Celular, AP.CEPID
• Assunto(s): Genética médica Síndrome de Marfan Células endoteliais Matriz extracelular Fibrilina-1 Resposta imune Mecanismos de controle celular Modelagem
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: celula endotelial | hiPSC | Sindrome De Marfan | Cultura de células e genética molecular

Resumo

Em pacientes afetados pela Síndrome de Marfan (MFS), a produção de microfibrilas da matriz extracelular é afetada por mutações no gene FBN1, que resultam na produção de um tecido conjuntivo frágil e instável. Dessa forma, a síndrome possui efeitos fenotípicos sistêmicos, afetando principalmente os tecidos ósseo, ocular e cardiovascular, sendo este último o mais preocupante, responsável pela redução da expectativa de vida devido à formação de aneurismas aórticos rompidos. As alterações na síntese de fibrilina-1, codificada por FBN1, não alteram somente o arranjo da matriz extracelular através da fragmentação das fibras elásticas. As células que constituem os vasos também são afetadas causando maior rigidez vascular, principalmente as células endoteliais, que devido à sua posição anatômica se tornam mais vulneráveis aos impactos do fluxo sanguíneo em um tecido enfraquecido. O endotélio, além de ser responsável por regular a homeostase, atua como mediador da comunicação com as células vasculares de músculo liso e também possui funções relacionadas com sua permeabilidade e atuação em respostas imunes e inflamatórias. Num contexto patológico essas funções são prejudicadas, configurando um cenário propício para o desenvolvimento de aneurismas, que podem culminar em ruptura do vaso. moDiferentes modelos foram propostos para estudo da MFS e dentre eles as hiPSC (human induced pluripotent stem cells) vem se consolidando como importante ferramenta para modelagem dessa doença. No intuito de entender os mecanismos celulares e moleculares envolvidos na MFS, nosso grupo gerou linhagens de hiPSC nas quais mutações no gene de FBN1 foram induzidas. As mutações mimetizam o modelo dominante negativo e haploinsuficiente nos quais a expressão de fibrilina-1 é diferencialmente afetada. Considerando a importância do fenótipo cardiovascular na MFS, no presente estudo pretendemos padronizar o protocolo de diferenciação das linhagens de hiPSC geradas em células endoteliais analisar os diferentes padrões de expressão de fibrilina-1 nas mesmas.