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Understanding the molecular interactions and stability of Green Fluorescent Protein (GFP) in ionic liquids under stress conditions

Processo: 18/20833-0
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Iniciação Científica
Vigência (Início): 29 de janeiro de 2019
Vigência (Término): 28 de maio de 2019
Área do conhecimento:Interdisciplinar
Pesquisador responsável:Jorge Fernando Brandão Pereira
Beneficiário:Carolina Falaschi Saponi
Supervisor no Exterior: Tamar Greaves
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Local de pesquisa : RMIT University, Melbourne, Austrália  
Vinculado à bolsa:18/01858-2 - Estudo do efeito estabilizador de diferentes solventes na estrutura da proteína verde fluorescente recombinante produzida por Escherichia coli, BP.IC
Assunto(s):Biotecnologia   Proteínas de fluorescência verde   Técnicas biossensoriais   Biomarcadores   Líquidos iônicos

Resumo

A Proteína Verde Fluorescente(do inglês Green Fluorescent Protein - GFP) possui fluorescência intensa e natural, sendo facilmente quantificável e com excelente aplicação como biossensor e biomarcador. No entanto, a manifestação de sua fluorescência é dependente da manutenção da integridade de sua estrutura proteica, que é muito sensível a diferentes condições, como altas temperaturas, valores extremos de pH ou presença de substâncias desnaturantes. A instabilidade da GFP sob várias condições, aliada ao alto custo de produção, restringe seu uso a aplicações de pequena escala. Assim, o estudo de solventes que protegem a estrutura da GFP sob condições de estresse é essencial para permitir seu uso em larga escala. O objetivo deste projeto é estudar as interações que ocorrem em nível molecular entre a GFP e soluções aquosas de diferentes solventes em diferentes condições, a fim de revelar as interações entre proteínas e ILs. Em particular, líquidos iônicos (ILs) em diferentes concentrações, temperaturas, pH e na presença de substâncias desnaturantes serão explorados. Este estudo tem como objetivo principal melhorar e ampliar as aplicações da GFP nos campos médico e industrial. A intensidade de fluorescência será avaliada em associação com estudos aprofundados de sua estrutura secundária e terciária, utilizando técnicas de espectroscopia e técnicas de espalhamento de luz.

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